[发明专利]纤连蛋白稳定剂及添加相应稳定剂的纤连蛋白制剂

说明书

本发明属于大分子蛋白质应用领域，具体公开了一种纤连蛋白稳定剂及添加相应稳定剂的纤连蛋白制剂。所述纤连蛋白稳定剂的有效成分为海藻酸钠或海藻酸钠与胶原水解物的混合物或海藻酸钠、胶原水解物、甘油三者复配形成的混合物。所述纤连蛋白制剂含有纤连蛋白和所述的纤连蛋白稳定剂。本发明提供的纤连蛋白稳定剂均能提高纤连蛋白水溶液的聚集稳定性和分散稳定性，有利于纤连蛋白水溶液在较长时期内保持其稳定性。本发明制备的纤连蛋白制剂具有优良的聚集稳定性和分散稳定性，可在室温条件下的长期保存；而且，应用范围广，具有重要的推广应用价值。

技术领域

本发明属于大分子蛋白质应用领域，具体涉及一些纤连蛋白水溶液体系稳定剂，同时还涉及添加有相应稳定剂的纤连蛋白制剂。

背景技术

纤连蛋白(又称纤连蛋白，Fibronectin，英文缩写为FN)是一种分子量为470-500kDa的大分子冷凝糖蛋白，广泛存在于动物组织和组织液中，如血浆、乳汁、羊水和唾液等。纤连蛋白是动物体内具有重要生物学功能的生长因子，因其结构上的多个功能域而具有多种生物学性质。目前，纤连蛋白在细胞培养、神经修复和临床输注等领域获得了广泛应用。由改良猪血浆纤连蛋白制备的伤口敷料也已获得发明专利。纤连蛋白在美容护肤领域也有着极大的潜力。

纤连蛋白一般从血浆中分离制备，制备过程中为防止纤连蛋白降解，须将血浆在-20℃储存，所有纯化步骤必须在4℃以下进行。分离出的纤连蛋白分散于水中，具有一定程度的动力学稳定性，能在一定时间内保持溶液的稳定。但该体系本质上是热力学不稳定体系，容易受环境温度变化影响而在较短时间内发生聚沉。为便于长期储存和运输，工业生产中多采用冻干制剂的形式存储蛋白质，而针对即用型纤连蛋白水溶液的聚集稳定性研究尚处于空白，也缺少相应的改善纤连蛋白水溶液稳定性的试剂和体系。对于其他常见的蛋白质制品，市面上虽然也已开发出了多种多样的添加剂声称为其提供稳定效果，然而必须注意的是，多数添加剂的目的是为了提高蛋白质的抵抗变性能力，而不是为了防止蛋白质聚沉或提升其分散稳定性。同时，添加剂的作用具有两面性，既可能稳定蛋白质，也可能诱发蛋白质的结构变化以至发生聚沉。因此，针对纤连蛋白这一特定蛋白质制剂，其添加剂的选择需要大量不断试错的反馈性闭环实验。

前期探索性实验中，本专利发明人为观测纤连蛋白水溶液的性状，在无菌条件下(万级无菌实验室)配制了浓度分别为0.1mg/mL、0.5mg/mL、1mg/mL、1.5mg/mL、2mg/mL的纤连蛋白水溶液，密封放置于室温下，每天观察并记录其性状变化。观察结果显示，不同浓度的纤连蛋白水溶液均在第4天或5天出现浑浊，在第7天观察到肉眼可辨的絮状沉淀。聚沉后的纤连蛋白不易再次分散，使得体系中的实际有效剂量降低。在美容护肤领域应用时，蛋白质沉淀的存在会影响涂覆的均匀性，削弱其修复效果。此外，如将纤连蛋白水溶液作为喷雾剂使用，絮状沉淀极易堵塞喷头，直接导致产品无法继续使用。基于这些问题，本领域亟待开发一种纤连蛋白制剂，以使其水溶液分散体系的聚集稳定性得到改善。

发明内容

针对现有技术中存在的问题和不足，本发明的目的之一是提供一种纤连蛋白稳定剂，本发明的目的之二是提供一种纤连蛋白制剂。

为实现发明目的，本发明采用的技术方案如下：

海藻酸钠在制备纤连蛋白稳定剂中的应用。

一种纤连蛋白稳定剂，其有效成分的重量组成为：海藻酸钠1～5份、胶原水解物1～5份。本发明中的胶原水解物均以固形物计算。

根据上述的纤连蛋白稳定剂，为进一步方便使用，节约使用前的溶解工序，所述稳定剂是由海藻酸钠、胶原水解物分散到水中形成的水溶液。

一种纤连蛋白稳定剂，其有效成分为海藻酸钠、胶原水解物和甘油。

根据上述的纤连蛋白稳定剂，优选地，其有效成分的重量组成为：海藻酸钠1～5份、胶原水解物1～5份、甘油10～50份；所述稳定剂是由海藻酸钠、胶原水解物和甘油分散到水中形成的水溶液。