[发明专利]希瓦氏菌GZ-7及其产右旋糖酐酶的方法

说明书

本发明是一种希瓦氏菌(Shewanellasp.)GZ‑7，其保藏号为CGMCC NO.17008。属微生物技术领说。本发明还公开了希瓦氏菌GZ‑7产右旋糖酐酶的方法及右旋糖酐酶产品。本发明还公开了利用所产右旋糖酐酶水解右旋糖酐的方法。本发明的有益效果是：本发明提供了一种新的分离筛选自种植甘蔗土壤中的希瓦氏菌GZ‑7。该菌株具有优良的特性，可以产右旋糖酐酶，有效地拓展了右旋糖酐酶的来源。

技术领域

本发明涉及一种微生物，特别是一种分离筛选自种植甘蔗土壤中的希瓦氏菌(Shewanella sp.)GZ-7，CGMCC NO.17008；本发明还涉及该菌株产右旋糖酐酶的方法和产品。

背景技术

右旋糖酐酶(Dextranase,α-D-1,6-Glucan-6-D-Glucanohydrolase,EC3.2.1.11)，是一种专一性水解右旋糖酐内部的α-1,6糖苷键的水解酶。按照右旋糖酐酶对葡聚糖的作用位点不同，可将右旋糖酐酶分为内切型和外切型两种。通过了解一种右旋糖酐酶的水解产物，内切型右旋糖酐酶通常从右旋糖酐内部水解产生寡聚低分子糖或中分子量右旋糖酐，而外切型右旋糖酐酶一般从右旋糖酐分子水解获得单糖。

右旋糖酐并不是蔗糖中的天然成分，是甘蔗在收割、运输、贮藏或者是压榨过程中由于环境中各种微生物的污染，最主要是细菌肠膜状串珠菌菌株利用蔗糖大量繁殖，从而将蔗糖糖转化而成一种相对分子质量较高的粘性多糖，这就是制糖工业中称之的“蔗饭”。粘性多糖的产生在甘蔗经冻害而裂开，或者是温度的暂时回升的情况变得尤为严重。此外，经过腐败变质的甘蔗，葡聚糖的含量也会相应的增高。

在澳大利亚等国，用右旋糖酐酶来处理已经腐败的甘蔗，已经成为了一种常规的行之有效的方法，并且该方法不含有任何技术问题，而对于蔗糖制造业中的pH值可以用pH计来进行直接的检测，当甘蔗汁的pH低于5时再加入右旋糖酐酶是最经济有效的办法。除此之外，右旋糖酐酶还可以应用于粗糖的制备工艺或者是甜菜糖的生产过程中，日本已经就右旋糖酐酶在制糖工艺的应用这方面已申请了专利。我国在2012年将右旋糖酐酶作为食品添加剂。

所以，研究新的可以产右旋糖酐酶的新菌种具有重要的意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种新的能产右旋糖酐酶的希瓦氏菌GZ-7。

本发明所要解决的另一个技术问题是提供上述希瓦氏菌GZ-7菌株产右旋糖酐酶的方法。

本发明的特征包括希瓦氏菌(Shewanella sp.)GZ-7菌株本身。本发明所涉及的菌株GZ-7是在中国广东省种植甘蔗的土壤中分离到的希瓦氏菌(Shewanella sp.)GZ-7。该菌株已于2018年12月19日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，保藏号是CGMCCNO.17008。保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，联系电话：010-64807355。

本发明还公开了利用菌株GZ-7发酵生产右旋糖酐酶的方法。该方法步骤如下：将希瓦氏菌GZ-7菌株斜面种子接种到LB培养基中，30℃，180r/min，装液量20％，培养18h，得种子液；将种子液以2.5％的接种量接种于产酶培养基中，180r/min，35℃培养48h，10000r/min离心5min，取上清液即为右旋糖酐酶粗酶；所述的产酶培养基为：硫酸钠1％，可溶性淀粉0.5％，右旋糖酐T401％，pH7.5。

本发明还公开了一种利用上述方法所产右旋糖酐酶水解右旋糖酐的方法，其特点是：将该右旋糖酐酶与右旋糖酐在40℃反应1-5h，使用具有葡萄糖和麦芽低聚糖的样品作为标准，点样后将硅胶板板浸入含有10ml正丁醇，6ml乙醇和4ml水的溶液中，然后在120℃加热，在TLC板上观察水解产物；水解产物为葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、麦芽四糖、麦芽五糖。