[发明专利]一种通用于血清中类固醇激素的释放剂及其制备方法

说明书

本发明公开了一种通用于血清中类固醇激素的释放剂及其制备方法，由酰胺类化合物、金属螯合剂、防腐剂、表面活性剂、甾体杂环化合物和去离子水组成，本发明制备的通用于血清中类固醇激素的释放剂当做样本预处理液用于类固醇激素项目检测试剂中，根据人血清标本中类固醇激素的特异性和主要的存在形式，将人血清中络合态的睾酮、雌二醇、孕酮和皮质醇从各自的结合蛋白中释放出来后，采用化学发光免疫分析法(CLIA)对游离态的激素进行检测验证，使得样本结果测值准确。

技术领域

本发明涉及一种免疫分析技术领域，具体涉及一种通用于血清中类固醇激素的释放剂及其制备方法。

背景技术

类固醇激素(steroidhormone)又称甾体激素，是胆固醇经细胞色素P450(cytochromeP450)酶催化形成的一类具有环戊烷多氢菲结构的化合物。类固醇激素主要分为4类：孕酮、皮质醇、雌二醇和睾酮。类固醇激素对人体新陈代谢、维持内环境稳定、生长、发育及生殖行为等方面起着重要的调节作用[1-2]。类固醇激素分析方法是临床检测学、内分泌学以及其他交叉学科相关领域的重要研究内容之一。

其中在人体血液中98％睾酮分子跟性激素结合球蛋白(SHBG)结合，几乎所有的雌二醇分子都以结合蛋白的形式存在，孕酮主要结合白蛋白，其次是与性激素结合球蛋白(SHBG)结合，以及血液中大部分的皮质醇与结合蛋白结合，大约1％的皮质醇以原型经尿液排出。而在临床诊断当中这4种类固醇激素只有检测游离态的才具有临床意义。怎样将样本血清中这4种类固醇激素从结合态中释放出来成为游离态的分子就成了实验研发中的一个难题。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种通用于血清中类固醇激素的释放剂及其制备方法，将该释放剂应用在类固醇激素的的临床实验中，能够将血清中结合态的4种激素从各自结合蛋白中释放出来，通过测定游离态激素的含量来获得样本临床实验数据，提高临床准确性。

本发明的目的采用如下技术方案实现：

一种通用于血清中类固醇激素的释放剂，由以下试剂组成：

0.1-0.5wt％的酰胺类化合物、0.01-0.1wt％的金属螯合剂、0.05-0.2wt％的防腐剂、0.05～0.5wt％的表面活性剂和0.005-0.015wt％的甾体杂环化合物，其余为去离子水；其中，酰胺类化合物为N,N-二甲基甲酰胺和/或N-甲基乙酰胺；酰胺类化合物用于提高甾体杂环化合物的溶解性及稳定性。甾体杂环化合物包括甲氢睾酮、达那唑和雄诺龙中的一种或几种。

达那唑为17α-乙炔睾丸酮的衍生物，为合成雄激素，具有弱雄激素活性，兼有蛋白同化作用和抗雌激素作用。但无孕激素和雌激素活性。达那唑和雄诺龙均为雄激素类。N-甲基乙酰胺具有溶解其它有机物的优良性能，所以在有机合成上常用作溶剂使用。α-巯基乙基磺酸钠主要用作表面活性剂中间体、日化及医药中间体。甾体杂环化合物与待检测的类固醇激素结构类似，可以将类固醇激素从结合蛋白中解离释放出来，从而甾体杂环化合物可以与结合蛋白结合，而待检测的类固醇激素处于游离状态，方便后续的检测。

本发明制备的通用于血清中类固醇激素的释放剂当做样本预处理液用于类固醇激素项目检测试剂中，根据人血清标本中类固醇激素的特异性和主要的存在形式，将人血清中络合态的睾酮、雌二醇、孕酮和皮质醇从各自的结合蛋白中释放出来，使之处于游离状态，采用化学发光免疫分析法(CLIA)对游离态的激素进行检测验证，使得样本结果测值准确。

进一步，所述金属螯合剂为EDTA和/或DTPA。EDTA和DTPA都是氨基羧酸类。EDTA能与Mg²⁺、Ca²⁺、Mn²⁺和Fe²⁺等二价金属离子结合的螯合剂。由于多数核酸酶类和有些蛋白酶类的作用需要Mg²⁺，故EDTA也常用做核酸酶和蛋白酶的抑制剂。DTPA是高效鳌合剂，鳌合性强，能迅速与钙、镁、铁、铅、铜、锰等离子生成水溶性络合物。