[发明专利]一种好氧反硝化菌的现场快速扩培方法

说明书

本发明属于微生物培养技术领域，公开了一种好氧反硝化菌的现场快速扩培方法，包括如下步骤：(1)将好氧反硝化菌菌液加入一级培养罐内并加入培养基，加水稀释，进行充氧和搅拌，培养得到菌液；(2)将2个二级培养罐进行消毒处理，每个培养罐加水稀释，进行充氧和搅拌，培养得到菌液；(3)将2个三级培养罐进行消毒处理，将步骤(2)得到的菌液接入三级培养罐内，装入培养基加水，进行充氧和搅拌，培养得到菌液；(4)将步骤(3)得到的菌液一半转移至三级培养罐，加入培养基加水，进行充氧和搅拌，培养得到2吨好氧反硝化菌菌液；(5)根据需要，可重复步骤(3)、(4)得到吨级菌液。本发明扩培方法操作简单，投入经费小，实用性强。

技术领域

本发明属于微生物培养技术领域，涉及一种好氧反硝化菌的现场快速扩培方法。

背景技术

好氧反硝化菌是利用好氧反硝化酶的作用，在有氧条件下进行反硝化作用的一类反硝化菌，是一类好氧或兼性好氧、以有机碳作为能源的异养硝化菌，主要存在于假单胞菌属、产碱杆菌属、副球菌属和芽孢杆菌属等。由于微生物菌剂在应用时必须保持有效活菌数和细菌的活性，但是项目情况随时在发生变化并且微生物菌剂投加具有持续性，若在菌剂厂生产包装好在运往现场则会导致运费高、现场保存时间长等原因增加项目成本和影响细菌质量。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服上述缺陷，提供一种好氧反硝化菌的现场快速扩培方法，为有效菌提供增殖所需的营养物质、氧气与空间，实现在项目所在地进行有效菌现场扩培，保证扩培与应用有效连接，保证有效微生物的活菌数，还能够大幅度降低运输成本、时间成本等。

为了解决上述技术问题，本发明的技术方案为：

一种好氧反硝化菌的现场快速扩培方法，包括如下步骤：

(1)实验室接种扩培好氧反硝化菌菌液，作为现场扩培的好氧反硝化菌菌种液；

(2)将微孔曝气盘连接上曝气管，曝气管上连接调节阀门用于调节曝气量，放在一级培养罐内，利用75％浓度酒精对一级培养罐、曝气盘、曝气管消毒，并用纱布和玻璃绳对桶口进行绑扎，并对纱布进行消毒；

(3)将好氧反硝化菌菌液加入一级培养罐内并加入配置好的培养基，加水稀释至20L，开启微型曝气机进行充氧和搅拌，培养48小时得到菌液；

(4)将2个二级培养罐进行步骤(2)处理，将步骤(3)得到的菌液分别接入2个二级培养罐内，并将培养基平均装进2个二级培养罐内，每个培养罐加水稀释至50L，开启微型曝气机进行充氧和搅拌，培养48小时得到菌液；

(5)将2个三级培养罐进行步骤(2)处理，将步骤(4)得到的菌液接入其中一个三级培养罐内，并将培养基装进三级培养罐内，加水至500L，开启微型曝气机进行充氧和搅拌，培养48小时得到菌液；

(6)将步骤(5)得到的菌液转移250L至另外一个三级培养罐，并将培养基装进两个三级培养罐内，加水至1000L，开启微型曝气机对两个三级培养罐进行充氧和搅拌，培养48小时，得到2吨好氧反硝化菌菌液；

(7)根据需要，可重复步骤(5)、(6)得到吨级菌液。

优选的，所述细菌菌种的接种比≥15％；其中一级扩培接种比为15％，二级扩培和三级扩培接种比为20％，吨级扩培接种比为25％，使目标细菌成为绝对优势细菌。

优选的，步骤(3)所述好氧反硝化菌菌液的加入量为3L。

优选的，所述一级培养罐、二级培养罐、三级培养罐的体积比为1:3:50。

优选的，步骤(2)所述微孔曝气盘是利用微孔曝气管盘成，所述曝气管是具有相同管径的塑料软管，所述曝气管在培养罐外部分配套安装阀门。