[发明专利]荧光分子、其制备方法、其应用和荧光检测试剂

说明书

本发明公开了荧光分子、其制备方法、其应用和荧光检测试剂。荧光分子，其为具有式(1)结构的化合物，式(1)如下：其中R₁为烷基或取代芳香基，R₂为含有‑HC＝N‑N＝CH‑基团的取代芳香基团。该荧光分子中的‑HC＝N‑N＝CH‑基团能够特异性地与次氯酸根作用，使得其可以对次氯酸根有裸眼识别的能力，同时，能够准确、灵敏、特异性且高效地检测次氯酸根离子。

技术领域

本发明涉及生物分析技术领域，具体而言，涉及荧光分子、其制备方法、其应用和荧光检测试剂。

背景技术

次氯酸根的氧化性极强，是一种众所周知的消毒剂，它作为一种重要的活性氧存在于生物体内，在细胞氧化还原平衡中起着至关重要的作用，参与众多的生理、病理过程，包括肝损伤和癌症，同时还可以与多种蛋白质、脂肪酸、胆固醇，以及DNA、RNA等发生反应。次氯酸根的另一种重要特性是抗菌性，它主要是通过接触反应中所需要的酶来实现这种抗菌杀菌作用，而这又是以氧化某种病毒的途径达到的。而其中的活生物体里，内源性副产物主要是由过氧化氢和氯离子在一次(近)催化反应中产生的，当体内次氯酸根浓度及pH值不处于正常生理范围时，都会对机体造成严重危害，引发各种疾病，举例有:常见的心血管类疾病、难以治疗的癌症、常发的联节性炎症以及影响智力的阿尔茨海默氏症等。因此，揭示ClO^-在疾病的发生和发展是开发用于ClO^-的荧光探针的重要功能，而生物体内的次氯酸根浓度及pH值能被精确地检测，这也具有重要的意义，其中最为显著的是：可以研究生理功能的变化和运行机制、解决病变过程中的问题，同时对实际应用的荧光探针的研制提出了更高的要求。

目前测定次氯酸根的常见方法，主要有:分光光度测定法、荧光测定法、化学发光测定法、磷光测定法、电化学测定法等。

次氯酸(HClO)作为一种高效氧化剂，众所周知是先天免疫系统中病原体的关键“杀手”。越来越多的证据表明，细胞内HClO在调节炎症和细胞凋亡中发挥着额外的重要作用。然而，参与HClO分布的细胞器仍然未知，导致难以充分利用其在细胞信号传导途径和各种疾病中的生物学功能。其中一个主要原因在于，HClO的强氧化易分解和不稳定，导致其缺乏有效的化学工具来直接检测亚细胞水平。最近几年研制了一系列HClO/ClO-荧光探针，然而，它们大多存在以下局限性：大多探针的检测是基于短波长发射识别、因此背景干扰强，识别灵敏度差；大多探针都是非比率型荧光探针，因此对信号的识别是单一的，此外，近红外次氯酸跟荧光探针更是不多。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供荧光分子，其能够高效、灵敏的检测次氯酸根，且可以对ClO^-有明显的裸眼识别能力。

本发明提供的荧光检测试剂，对次氯酸根的检测是基于比率荧光识别和近红外发光识别的(800nm)。因此，本发明的检测方法提升了现有次氯酸根检测的灵敏度和准确性。

本发明的另一目的在于提供荧光分子的制备方法，该方法操作简单、物料易得，便于实施。

本发明是这样实现的：

第一方面，本发明实施例提供一种荧光分子，其为具有式(1)结构的化合物，式(1)如下：其中R₁为烷基或取代芳香基，R₂为含有-HC＝N-N＝CH-基团的取代芳香基团。

第二方面，本发明实施例提供如前述实施方式任一项所述的荧光分子的制备方法，包括以下步骤：

将1,7-二取代-3,4,9,10-苝四甲酸酐与胺类物质反应形成中间体1；

而后中间体1与苯甲醛类化合物反应形成中间体2；

中间体2与芳香醛缩合肼类物质反应形成所述荧光分子。