[发明专利]一种透射电镜分析用微阵列超薄支持膜的制备方法

说明书

本发明公开了一种透射电镜分析用微阵列超薄支持膜的制备方法，包括：在微孔阵列模板上涂覆一层亲水剂后，在所述微孔阵列模板上涂覆一层碳膜，使在所述微孔阵列模板上形成微筛碳支持膜；将带有所述微筛碳支持膜的所述微孔阵列模板浸在水里，使所述微筛碳支持膜漂浮在水面上；通过表面覆盖有有机膜的金属载网将所述微筛碳支持膜移出水面，使所述微筛碳支持膜紧贴在金属载网上的有机膜上并在所述金属载网上晾干；在所述微筛碳支持膜的一侧表面喷涂一层薄碳膜，用不损伤所述微筛碳支持膜的溶剂将覆盖在所述金属载网上的有机膜溶掉，得到微阵列超薄支持膜。本发明提供的微阵列超薄支持膜的制备方法具有工艺简单、效率高、适合大规模工业生产的优点。

技术领域

本发明属于透射电镜样品支持膜制备方法技术领域，具体涉及一种透射电镜分析用微阵列超薄支持膜的制备方法。

背景技术

透射电子显微镜可在纳米甚至原子尺度对物质的形态、结构进行表征，因此广泛应用于生命科学、医学、物理、材料、化学等领域。目前，透射电子显微镜样品通常用带有小孔的金属载网支持，而支持载网上通常覆盖有有机膜或碳膜。特别对于纳米材料、低温冷冻生物样品等的观察，通常用支持膜上带有小孔的微筛膜以使样品在小孔中获得低背景的图像。而微孔大小一致，分布规则的阵列微筛膜则为样品的观察一致性、及图像数据的自动化收集带来很大的便利性，广泛受到人们的欢迎和使用。由于为了解决某些大分子在冷冻样品制备中不容易分布在孔里的问题，人们通常在多孔碳膜上再铺一层超薄碳膜，以增加大分子在孔内的分布浓度，同时也保证低的背底噪音。这种铺有超薄碳膜的微筛阵列支持膜在大分子的负染色方法中也经常使用，主要为小尺寸蛋白提供更好的图像信噪比。

目前，制备此类微阵列超薄碳支持膜采用捞取法，这这种制备方法包括：首先，在洁净的云母片上用热蒸发的方法喷一层超薄碳膜，厚度通常小于5nm；然后把超薄碳膜漂浮在水面上，用镊子夹着一枚微筛(或微筛阵列)支持膜去捞取超薄碳膜，放在滤纸上晾干。用这种方法制备微筛(或微筛阵列)超薄碳支持膜效率低，需一枚一枚的制备，而且超薄碳膜容易破损、起皱。同时，该方法不能保证超薄碳膜与微筛阵列支持膜贴合紧密没有缝隙。

发明内容

针对上述现有技术存在的不足之处，本发明提供了一种透射电镜分析用微阵列超薄支持膜的制备方法。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种透射电镜分析用微阵列超薄支持膜的制备方法，包括：

在微孔阵列模板上涂覆一层亲水剂后，在所述微孔阵列模板上喷镀一层碳膜，使在所述微孔阵列模板上形成微筛碳支持膜；

将带有所述微筛碳支持膜的所述微孔阵列模板浸在水里，使所述微筛碳支持膜漂浮在水面上；

通过表面覆盖有有机膜的金属载网将所述微筛碳支持膜移出水面，使所述微筛碳支持膜在所述金属载网上晾干；

在所述微筛碳支持膜的表面喷涂一层薄碳膜后，用不损伤所述微筛碳支持膜的溶剂将覆盖在所述金属载网上的有机膜溶掉，即可得到微阵列超薄支持膜。

进一步的，所述金属载网是由铜箔片、镍箔片、金箔片、钼箔片、不锈钢箔片中的一种或几种制备而成的直径为3mm的透射电镜实验用金属载网。

进一步的，所述有机膜包括方华膜或火棉胶膜。

进一步的，所述方华膜的制备方法，包括：

将方华粉溶解在氯仿溶液中，制备得到质量百分比浓度为0.2～0.4％的方华溶液；

将载玻片垂直插入所述方华溶液中并静置约半分钟，再匀速地将所述载玻片提出；

将吸附有所述方华溶液的所述载玻片置于空气中晾干，使所述载玻片的表面形成方华膜，再用刀片沿所述载玻片边沿把所述方华膜划开；