[发明专利]乳腺癌细胞特异性适配子及其筛选方法

说明书

本发明提供乳腺癌细胞特异性适配子及其筛选方法。该DNA适配子对乳腺癌细胞具有高特异性、高亲和力。该方法可在较短时间获取特异性结合乳腺癌细胞的DNA适配子，显示出结合肿瘤亚型细胞的特征。

技术领域

本发明涉及生物化学领域，具体涉及靶向药物。包括体外检测、靶向示踪、分子影像、靶向治疗等。

背景技术

乳腺癌是全球女性发病率最高和死亡率最高的恶性肿瘤，严重威胁患者生命健康。乳腺癌具有明显的异质性：可分为多个分子亚型，不同亚型之间的临床和病理特征各不相同，在治疗敏感性、基因表达、浸润转移、生存预后等方面也存在很大差异。

由于乳腺癌存在异质性，目前临床将乳腺癌分为多种分子病理亚型，并根据各亚型特征进行个体化治疗，包括手术、化放疗、内分泌治疗和分子靶向治疗。但由于乳腺癌的异质性问题，增加了诊断治疗的难度、降低了效率。目前还难以实现真正意义上的精准、高效个体化治疗。

SELEX是近年来发展起来的一种新技术，通过SELEX技术筛选得到的适配子具有更强大的分辨能力，能区别细胞之间的微小差异。尽管有文献报道，通过乳腺癌细胞筛选得到了一些适配子，但这些适配子在用于细胞的诊断中有一定的局限性。

发明内容

本发明的目的是提供乳腺癌细胞特异性适配子，其特征在于:适配子序列包括如核酸序列表SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示的适配子中的至少一种：

SEQ ID NO.1：

ATACCAGCTTATTCAATTGCAACCCTTTATTACCTTAACTGTAGTTATTTAGAT TCCTTCTTCTTCCCCCAGATAGTAAGTGCAATCT

SEQ ID NO.2：

ATACCAGCTTATTCAATTGCAACCTTTTATTACCTTAACTGTAGTTATTTAGAT TCCTTCTTCTTCCCCTAGATAGTAAGTGCAATCT。

本发明要求保护上述适配子在制备靶向识别乳腺癌细胞的药物中的应用。

本发明要求保护上述适配子在制备靶向结合乳腺癌细胞的药物中的应用。

本发明要求保护乳腺癌细胞特异性适配子的筛选方法，其特征在于:在SELEX筛选过程中，采用人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231 作为正筛选的靶细胞，以正常乳腺上皮细胞MCF-10A作为负筛选的靶细胞。

进一步，采用MCF-7和MDA-MB-231两个靶细胞进行交叉、串联筛选；最后再进行正常乳腺细胞MCF-10A负筛选。

进一步，采用MCF-7和MDA-MB-231两种靶细胞中的一个进行连续两轮筛选后，更换两种靶细胞中的另外一种靶细胞进行连续两轮筛选；重复上述过程若干次后，采用正常乳腺细胞MCF-10A进行连续两轮负筛选。

本发明的技术效果是毋庸置疑的，该DNA适配子对不同亚型乳腺癌细胞具有高特异性、高亲和力，并通过实验得以证明。

附图说明

图1筛选流程图

图2空白与MCF-10A细胞结合激光共聚焦结果。

图3 0级库(原始库)与MCF-7细胞结合激光共聚焦结果。

图4 22级库与MCF-7细胞结合激光共聚焦结果。

图5空白与MDA-MB-231细胞结合激光共聚焦结果。

图6 0级库与MDA-MB-231细胞结合激光共聚焦结果。

图7 22级库与MDA-MB-231细胞结合激光共聚焦结果。