[发明专利]采用HPLC-UV法检测葛兰心宁软胶囊中绞股蓝皂苷A的方法

权利要求书

1.一种采用HPLC-UV法检测葛兰心宁软胶囊中绞股蓝皂苷A的方法，其特征在于：葛兰心宁软胶囊直接经过预处理后，采用高效液相色谱仪测定，即得每粒葛兰心宁软胶囊含绞股蓝总苷以绞股蓝皂苷A计，不得少于0.5mg，具体步骤如下：

(1)色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.1％磷酸-乙腈比例为70：30为流动相；紫外检测器：检测波长为203nm；流速为1ml/min；柱温为30℃；按绞股蓝皂苷A峰计应不低于5000；

(2)供试品溶液的制备

取葛兰心宁软胶囊8～12粒，加入10％甲醇80～120ml，称定重量，水浴回流1～3小时，放冷，再称定重量，用10％甲醇补充减失的重量，摇匀，离心；离心后取上清液，弃去油层，称取水层20～30ml，置分液漏斗中，用甲基叔丁基醚20～30ml振摇提取1～2次，弃去醚液，水液用水饱和的正丁醇振摇提取3～5次，每次20～30ml，合并正丁醇液，用氨试液20～30ml洗涤，弃去氨液，再用正丁醇饱和的水洗涤2～3次，每次20～30ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得供试品溶液；

(3)标准溶液的配置

精密称取一定量绞股蓝皂苷A对照品，用甲醇制成每1ml含0.2mg溶液，即得标准溶液；

(4)样品分析：分别吸取对照品溶液与供试品溶液各5～20μl，注入液相色谱仪中测定；

(5)测定结果：葛兰心宁软胶囊每粒含绞股蓝总苷以绞股蓝皂苷A计，不得少于0.5mg。

2.根据权利要求1所述的一种采用HPLC-UV法检测葛兰心宁软胶囊中绞股蓝皂苷A的方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.1％磷酸-乙腈比例为70：30为流动相；紫外检测器：检测波长为203nm；流速为1ml/min；柱温为30℃；按绞股蓝皂苷A峰计应不低于5000；

(2)供试品溶液的制备

取葛兰心宁软胶囊10粒，置具塞锥形瓶中，加入10％甲醇100ml，称定重量，水浴回流1小时，放冷，再称定重量，用10％甲醇补充减失的重量，摇匀，离心；离心后取上清液，弃去油层，称取水层25ml，置分液漏斗中，用甲基叔丁基醚25ml振摇提取1次，弃去醚液，水液用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次25ml，合并正丁醇液，用氨试液25ml洗涤，弃去氨液，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次25ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得供试品溶液；

(3)标准溶液的配置

精密称取一定量绞股蓝皂苷A对照品，用甲醇制成每1ml含0.2mg溶液，即得标准溶液；

(4)样品分析

分别吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪中测定；

(5)测定结果

葛兰心宁软胶囊每粒含绞股蓝总苷以绞股蓝皂苷A计，不得少于0.5mg。