[发明专利]一种基于S100蛋白家族的急性胰腺炎严重程度预测模型及其检测方法

权利要求书

1.一种基于S100蛋白家族的急性胰腺炎严重程度预测模型，其特征在于，所述急性胰腺炎严重程度预测模型为Y＝e^x，其中X＝-3.102+(-5.98E-04)*S100A11+(3.33E-06)*S100A12+(6.28E-05)*S100A6+(2.46E-05)*S100A8+(-2.54E-05)*S100A9+(1.22E-04)*S100P，所述S100A6，S100A8，S100S9，S100A11，S100A12，S100P分别为待检测样本血清中S100A6，S100A8，S100S9，S100A11，S100A12，S100P蛋白的浓度，当Y值>0.14489时，提示为高重症胰腺炎发病风险。

2.根据权利要求1所述的预测模型的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)采集血清，依次加入裂解缓冲液和Tris-HCl缓冲液，所述血清、裂解缓冲液和Tris-HCl缓冲液的体积比为1:20:5，恒温孵育；

(2)加入碘乙酰胺，避光恒温孵育；

(3)胰酶消化得到肽段，所得肽段加入10μL pH 2-3的三氟乙酸酸化后，以C18SPE柱除盐，然后将所得肽段冻干；

(4)步骤(3)得到的样品复溶于复溶溶剂，采用DIA定量蛋白质组学分析方法检测血清中S100A6，S100A8，S100S9，S100A11，S100A12，S100P蛋白的浓度，并通过模型Y＝e^x，其中X＝-3.102+(-5.98E-04)*S100A11+(3.33E-06)*S100A12+(6.28E-05)*S100A6+(2.46E-05)*S100A8+(-2.54E-05)*S100A9+(1.22E-04)*S100P计算来进行急性胰腺炎严重程度的预测，当Y值>0.14489时，提示为高重症胰腺炎发病风险。

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中的裂解缓冲液为0.1M碳酸氢钠，6M尿素以及2M硫脲。

4.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中Tris-HCl缓冲液的PH值为8.5。

5.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中孵育条件为33℃下恒温孵育45分钟。

6.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中碘乙酰胺的浓度为40mM，碘乙酰胺与血清的体积比为1:4，孵育温度为25℃，孵育时间为1h。

7.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(3)中胰酶的用量为100μL，浓度为0.01ug/μL，胰酶消化条件为33℃下消化16h。

8.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(4)中的复溶溶剂为含有0.1％甲酸和2％乙腈的水溶液，所述复溶溶剂的体积为20μL。

9.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(4)DIA定量蛋白质组学分析方法参数设置具体为：样品分离采用120分钟液相色谱梯度，其中，流动相：A:体积比为0.1％的甲酸/水；B:体积比为0.1％的甲酸/水/乙腈，其中甲酸：水：乙腈的体积比为0.1：19.9：80；梯度：0～6min,3％-8％B，6～108min,8％-30％B,108～116min,30％-90％B，116～120min,90％-90％B；流速：300nL/min，进样量为0.4μg；质谱质核比范围设定为400to1000m/z，一级质谱分辨率设定为60000，二级质谱分辨率设定为30000。