[发明专利]麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体有效
| 申请号： | 201910853186.8 | 申请日： | 2017-09-13 |
| 公开（公告）号： | CN110592059B | 公开（公告）日： | 2021-03-02 |
| 发明（设计）人： | 吴敬;宿玲恰;姚锴琳 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/90 | 分类号： | C12N9/90;C12N15/61;C12N15/70;C12P19/24;C12P19/12 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 214000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 麦芽 寡糖 海藻 合成 突变体 | ||
1.一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶的突变体，其特征在于，将SEQ ID NO.1所示的麦芽寡糖基海藻糖合成酶的第439位置的苏氨酸（Thr）变成丙氨酸（Ala）。
2.一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶的突变体，其特征在于，将SEQ ID NO.1所示的麦芽寡糖基海藻糖合成酶的第439位置的苏氨酸（Thr）变成丙氨酸（Ala），并将第586位置的甘氨酸（Gly）变成天冬氨酸（Asp）。
3.一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶的突变体，其特征在于，将SEQ ID NO.1所示的麦芽寡糖基海藻糖合成酶的第439位置的苏氨酸（Thr）变成丙氨酸（Ala），并将第585位置的谷氨酰胺（Gln）变成精氨酸（Arg）。
4.一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶的突变体，其特征在于，将SEQ ID NO.1所示的麦芽寡糖基海藻糖合成酶的第439位置的苏氨酸（Thr）变成丙氨酸（Ala），并将第284位置的苯丙氨酸（Phe）变成缬氨酸（Val）。
5.编码权利要求1~4任一所述突变体的基因。
6.携带权利要求5所述基因的载体或重组细胞。
7.制备权利要求1~4任一所述突变体的方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）根据确定的突变位点，设计定点突变的突变引物，以携带麦芽寡糖基海藻糖合成酶基因的载体为模板进行定点突变；构建含有编码突变体的基因的质粒载体；
（2）将突变体质粒转化进宿主细胞；
（3）挑选阳性克隆进行发酵培养，离心收集细胞，细胞破壁上清液即为麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体的粗酶液。
8.权利要求1~4任一所述突变体在生产海藻糖中的应用。
9.权利要求5所述基因在生产海藻糖中的应用。
10.权利要求6所述载体或重组细胞在生产海藻糖中的应用。
11.生产海藻糖的酶制剂，其特征在于，包括权利要求1~4任一所述突变体。
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