[发明专利]酶活提高的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体

权利要求书

1.一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶的突变体，其特征在于，将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的麦芽寡糖基海藻糖合成酶的第586位置的甘氨酸（Gly）变成天冬氨酸（Asp）；

或，所述突变体是将第284位置的苯丙氨酸（Phe）变成缬氨酸（Val），并将第586位置的甘氨酸（Gly）变成天冬氨酸（Asp），得到F284V/G586D；

或，所述突变体是将第432位置的甘氨酸（Gly）变成天冬氨酸（Asp），并将第586位置的甘氨酸（Gly）变成天冬氨酸（Asp），得到G432D/ G586D；

或，所述突变体是将第284位置的苯丙氨酸（Phe）变成缬氨酸（Val）、将第439位置的苏氨酸（Thr）变成丙氨酸（Ala），并将第586位置的甘氨酸（Gly）变成天冬氨酸（Asp），得到F284V/T439A/G586D。

2.编码权利要求1所述突变体的基因。

3.携带权利要求2所述基因的载体或重组细胞。

4.制备权利要求1所述突变体的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）根据确定的突变位点，设计定点突变的突变引物，以携带麦芽寡糖基海藻糖合成酶基因的载体为模板进行定点突变；构建含有编码突变体的基因的质粒载体；

（2）将突变体质粒转化进宿主细胞；

（3）挑选阳性克隆进行发酵培养，离心收集细胞，细胞破壁上清液即为麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体的粗酶液。

5.权利要求1所述突变体在生产海藻糖中的应用。

6.权利要求2所述基因在生产海藻糖中的应用。

7.权利要求3所述载体或重组细胞在生产海藻糖中的应用。

8.生产海藻糖的酶制剂，其特征在于，包括权利要求1所述突变体。