[发明专利]一种靶向沉默害虫模式识别蛋白GNBP3基因表达的重组真菌及在害虫防治中的应用

说明书

本发明公开了一种靶向沉默害虫模式识别蛋白GNBP3基因表达的重组真菌及在害虫防治中的应用，本发明构建了能抑制或者阻断GNBP3基因转录的重组白僵菌。从而使得在重组白僵菌侵染害虫时，害虫体内抗菌肽表达显著下调，减弱或中断害虫识别免疫虫生真菌的信号传导，使害虫更易感染虫生真菌等病原微生物而致死。重组白僵菌显著提高害虫的死亡率，缩短死亡时间，并有浓度依赖性。将其与微生物源杀虫剂苏云金芽孢杆菌Bt或粘质沙雷氏菌结合，可以显著提高重组白僵菌对害虫的死亡率和死亡时间，说明其是一种很好的微生物杀虫剂的增效剂，不提提高杀效果，拓宽了杀虫谱，降低了微生物杀虫剂耐药性，是一种环境友好的微生物源杀虫剂。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，更具体地，涉及一种靶向沉默害虫模式识别蛋白GNBP3基因表达的重组真菌及在害虫防治中的应用。

背景技术

全世界有科学记载的昆虫大约有150万种，约占地球生物物种的一半，其中约有45％的昆虫是以绿色植物的叶片为食物危害植物，以农作物为食的昆虫会严重硬性农作物的品种产量，进而影响农户收益。

目前农业害虫的防治主要依赖化学农药，但化学农药的大量使用导致触目惊心的环境污染，给人类的健康造成了严重的危害，同时提高了昆虫的耐药性，因此，选择有效而无污染的害虫生物防治越来越受到重视。

虫生真菌在昆虫种群密度调控及有害昆虫生物防治方面发挥着重要的作用，已经鉴定种类有750多种，主要分布于子囊菌及结合菌门。昆虫虫生真菌非常适合做生物杀虫剂，其中子囊菌类的金龟子绿僵菌、蝗绿僵菌和球孢白僵菌等被开发成为重要的害虫生物防制剂。虫生真菌可大规模培养并能够长期保存，真菌孢子适合于常见的农林喷淋设备，与化学杀虫剂比较，昆虫致病性真菌对哺乳动物的毒性小，且对环境影响微不足道，昆虫致病性真菌具有对害虫可持续性控制特点，被广泛地用于农林害虫的防治。世界范围内注册使用的商业剂型真菌杀虫剂达170余种，在农业、林业及草原等害虫生物防治中取得了良好的生态、经济及社会效益。

但是害虫的免疫防御反应极大地延缓了目前使用的真菌杀虫剂的杀虫效率，昆虫的先天性免疫系统由细胞免疫和体液免疫组成。虫生真菌侵染昆虫，穿过体壁进入昆虫血腔时，遭受到昆虫的先天性免疫系统的防御，抑制或杀死了虫生真菌，阻碍了真菌的继续繁殖，直接延缓了虫生真菌的杀虫效率。