[发明专利]一种Anti CD70 CAR-T细胞及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 201910857176.1 | 申请日： | 2019-09-11 |
| 公开（公告）号： | CN110592023B | 公开（公告）日： | 2020-09-04 |
| 发明（设计）人： | 郭志刚;纪锋;刘蕊;邬婷;李恩洁;李露露;李梦晗;胡志刚 | 申请（专利权）人： | 浙江蓝盾药业有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/62;C12N15/867;A61K39/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 杨晓莉 |
| 地址： | 312030 浙江省绍兴*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 anti cd70 car 细胞 及其 制备 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种Anti CD70 CAR-T细胞，其特征在于，所述CAR-T细胞以CD70结构域为靶点，在T淋巴细胞内表达SCFV-CD8TM-4-1BB-CD3ζ融合蛋白；所述T淋巴细胞来源于人外周血分离的PBMC中；所述SCFV-CD8TM4-1BB-CD3ζ融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示。
2.权利要求1所述Anti CD70 CAR-T细胞的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）合成和扩增SCFV-CD8TM-4-1BB-CD3ζ融合蛋白基因，将所述SCFV-CD8TM-4-1BB-CD3ζ融合蛋白基因克隆到慢病毒表达载体上；
（2）利用慢病毒包装质粒和步骤（1）得到的慢病毒表达载体质粒感染293T细胞，包装和制备慢病毒；
（3）分离T淋巴细胞，培养扩增，利用步骤（2）得到的慢病毒感染T淋巴细胞，使所述T淋巴细胞表达SCFV-CD8TM-4-1BB-CD3ζ融合蛋白，得到Anti CD70 CAR-T细胞。
3.权利要求1所述Anti CD70 CAR-T细胞在制备治疗高表达CD70分子的肿瘤的药物中的应用，所述肿瘤为肾癌、脑胶质瘤。
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