[发明专利]草莓液泡加工酶编码基因FaVPE3及其应用

权利要求书

1.一种草莓液泡加工酶编码基因FaVPE3，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

2.一种如权利要求1所述的草莓液泡加工酶编码基因FaVPE3编码的蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。

3.一种如权利要求1所述的草莓液泡加工酶编码基因FaVPE3在基因工程调控果实糖酸品质中的用途，所述调控果实糖酸品质为提高果实中蔗糖、果糖、葡萄糖、柠檬酸和苹果酸含量。

4.如权利要求3所述的用途，其特征在于，构建所述草莓液泡加工酶编码基因FaVPE3的RNA干扰表达载体，将所述RNA干扰表达载体转入农杆菌，用微注射法感染草莓大绿果，建立基因FaVPE3表达下调的转基因草莓株系。

5.如权利要求4所述的用途，其特征在于，构建所述草莓液泡加工酶编码基因FaVPE3的RNA干扰表达载体包括如下步骤：

S1、以八倍体“红颜”草莓果实cDNAs为模版，利用序列如SEQ ID No.3、SEQ ID No.4所示的引物对，通过PCR扩增获得FaVPE3基因全序列；

S2、以所述FaVPE3基因全序列为模板，利用序列如SEQ ID No.5、SEQ ID No.6所示的引物对，PCR扩增获得FaVPE3基因特异片段；

S3、纯化回收所述FaVPE3基因特异片段后经BP重组反应克隆到pDONR221载体上，转化大肠杆菌感受态，获得含FaVPE3基因特异片段的pDONR221载体质粒；

S4、将所述含FaVPE3基因特异片段的pDONR221载体质粒通过LR重组反应插入干扰表达载体pK7GWIWG2D(II)中，转化大肠杆菌感受态，获得所述草莓液泡加工酶编码基因FaVPE3的RNA干扰表达载体。

6.如权利要求5所述的用途，其特征在于，步骤S1中，所述FaVPE3基因全序列的序列如SEQ ID No.1所示。

7.如权利要求5所述的用途，其特征在于，步骤S2中，所述FaVPE3基因特异片段为265bp。

8.如权利要求5所述的用途，其特征在于，步骤S2中，所述FaVPE3基因特异片段的序列如SEQ ID No.11所示。