[发明专利]适用于鉴别红肉蜜柚、白肉蜜柚和黄肉蜜柚的CAPS分子标记及其应用有效

专利信息
申请号: 201910858885.1 申请日: 2019-09-11
公开(公告)号: CN110468127B 公开(公告)日: 2022-06-21
发明(设计)人: 徐强;罗鑫;王霞;余惠文;苗萌萌;刘晓通 申请(专利权)人: 华中农业大学
主分类号: C12N15/11 分类号: C12N15/11;C12Q1/6895;C12Q1/6858
代理公司: 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 代理人: 樊戎;冯超
地址: 430070 湖*** 国省代码: 湖北;42
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摘要:
搜索关键词: 适用于 鉴别 红肉蜜柚 白肉 黄肉蜜柚 caps 分子 标记 及其 应用
【权利要求书】:

1.特异性引物对在鉴别红肉蜜柚、白肉蜜柚和黄肉蜜柚中的应用,其特征在于:所述特异性引物对由引物对RW F/R和引物对YW F/R组成,所述RW F/R,YW F/R如下:

正向引物RW-F:5'-CGCACTAATCTTTTCTCCCAACT-3',

反向引物RW-R:5'-AATACTACTCTCATTCTCCCCAA-3';

正向引物YW-F:5'- CTGCTTAGGGATTTGC -3',

反向引物YW-R:5'- TGTTCTGGTGGACTGG -3'。

2.试剂盒在鉴别红肉蜜柚、白肉蜜柚和黄肉蜜柚中的应用,其特征在于:所述试剂盒中含有权利要求1中的特异性引物对。

3.一种鉴定红肉蜜柚、白肉蜜柚和黄肉蜜柚的方法,其特征在于:包括以下步骤:

1)以待测蜜柚的基因组DNA为模板;采用权利要求1中的引物对RW F/R分别进行扩增,得到扩增产物;

2)用BstNS I酶对扩增产物进行酶切;

3)电泳,若酶切产物中具有414bp和88 bp的两个片段,则待测蜜柚为红肉蜜柚;

或者,若酶切产物中具有414bp、88 bp和502 bp的三个片段,则待测蜜柚为白肉蜜柚或黄肉蜜柚;

4)再以待测蜜柚的基因组DNA为模板,采用权利要求1中的引物对YW F/R分别进行扩增,得到扩增产物;

5)用 Bst4C I酶对扩增产物进行酶切;

6)电泳,若酶切产物中具有505bp、390bp和115bp的两个片段 ,则待测蜜柚为黄肉蜜柚;

或者,若酶切产物中具有390bp和115 bp的两个片段,则待测蜜柚为白肉蜜柚。

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