[发明专利]适用于鉴别红肉蜜柚、白肉蜜柚和黄肉蜜柚的CAPS分子标记及其应用有效
申请号: | 201910858885.1 | 申请日: | 2019-09-11 |
公开(公告)号: | CN110468127B | 公开(公告)日: | 2022-06-21 |
发明(设计)人: | 徐强;罗鑫;王霞;余惠文;苗萌萌;刘晓通 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/6895;C12Q1/6858 |
代理公司: | 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 | 代理人: | 樊戎;冯超 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 适用于 鉴别 红肉蜜柚 白肉 黄肉蜜柚 caps 分子 标记 及其 应用 | ||
1.特异性引物对在鉴别红肉蜜柚、白肉蜜柚和黄肉蜜柚中的应用,其特征在于:所述特异性引物对由引物对RW F/R和引物对YW F/R组成,所述RW F/R,YW F/R如下:
正向引物RW-F:5'-CGCACTAATCTTTTCTCCCAACT-3',
反向引物RW-R:5'-AATACTACTCTCATTCTCCCCAA-3';
正向引物YW-F:5'- CTGCTTAGGGATTTGC -3',
反向引物YW-R:5'- TGTTCTGGTGGACTGG -3'。
2.试剂盒在鉴别红肉蜜柚、白肉蜜柚和黄肉蜜柚中的应用,其特征在于:所述试剂盒中含有权利要求1中的特异性引物对。
3.一种鉴定红肉蜜柚、白肉蜜柚和黄肉蜜柚的方法,其特征在于:包括以下步骤:
1)以待测蜜柚的基因组DNA为模板;采用权利要求1中的引物对RW F/R分别进行扩增,得到扩增产物;
2)用
3)电泳,若酶切产物中具有414bp和88 bp的两个片段,则待测蜜柚为红肉蜜柚;
或者,若酶切产物中具有414bp、88 bp和502 bp的三个片段,则待测蜜柚为白肉蜜柚或黄肉蜜柚;
4)再以待测蜜柚的基因组DNA为模板,采用权利要求1中的引物对YW F/R分别进行扩增,得到扩增产物;
5)用
6)电泳,若酶切产物中具有505bp、390bp和115bp的两个片段 ,则待测蜜柚为黄肉蜜柚;
或者,若酶切产物中具有390bp和115 bp的两个片段,则待测蜜柚为白肉蜜柚。
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