[发明专利]一种与美洲南瓜短蔓基因CpV紧密连锁的分子标记、引物及应用

权利要求书

1.一种与美洲南瓜短蔓基因CpV紧密连锁的分子标记，其特征在于，所述分子标记为CpV-01或CpV-02；所述分子标记CpV-01由SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列组成；所述分子标记CpV-02由SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列和SEQ IDNO.4所示的核苷酸序列组成。

2.根据权利要求1所述的分子标记，其特征在于，所述分子标记CpV-01中，SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列与短蔓基因CpV连锁，SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列与长蔓基因cpv连锁。

3.根据权利要求1所述的分子标记，其特征在于，所述分子标记CpV-02中，SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列与短蔓基因CpV连锁，SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列与长蔓基因cpv连锁。

4.一种扩增权利要求1所述的分子标记的引物，其特征在于，分子标记CpV-01的引物核苷酸序列如SEQ ID NO.5-SEQ ID NO.6所示；分子标记CpV-02的引物核苷酸序列如SEQ IDNO.7-SEQ ID NO.8所示。

5.权利要求1-3任意一项所述的分子标记在美洲南瓜短蔓育种中的应用。

6.权利要求4所述的引物在美洲南瓜短蔓育种中的应用。

7.一种短蔓南瓜育种的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)以短蔓品系X10为母本，以长蔓品系为父本，将所述母本与父本进行杂交，所得F₁代与所述长蔓品系父本进行回交得到后代BC₁F₁，分别利用权利要求1所述的分子标记CpV-01和CpV-02扫描BC₁F₁群体，选择经分子标记CpV-01扫描后具有144nt、210nt和354nt核苷酸片段且经分子标记CpV-02扫描后具有390nt、395nt和785nt核苷酸片段的植株，与所述长蔓品系父本进行回交得到后代BC₂F₁；

2)分别利用分子标记CpV-01和CpV-02扫描BC₂F₁群体，选择经分子标记CpV-01扫描后具有144nt、210nt和354nt核苷酸片段且经分子标记CpV-02扫描后具有390nt、395nt和785nt核苷酸片段的植株，再与所述长蔓品系父本进行回交得到回交三代BC₃F₁；

3)分别利用分子标记CpV-01和CpV-02扫描BC₃F₁群体，选择经分子标记CpV-01扫描后具有144nt、210nt和354nt核苷酸片段且经分子标记CpV-02扫描后具有390nt、395nt和785nt核苷酸片段的植株，自交得到后代BC₃F₂；

4)分别利用分子标记CpV-01和CpV-02扫描BC₃F₂群体，选择经分子标记CpV-01扫描后具有144nt和210nt核苷酸片段且经分子标记CpV-02扫描后具有390nt和395nt核苷酸片段的植株，即为改良短蔓自交系。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述长蔓品系为JIN234。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述分子标记CpV-01扫描，是指利用SEQID NO.5-SEQ-ID NO.6所示的引物，以待检测植株的基因组DNA为模板进行PCR扩增，然后利用HindIII限制性内切酶对PCR扩增产物进行酶切。

10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述分子标记CpV-02扫描，是指利用SEQID NO.7-SEQ ID NO.8所示的引物，以待检测植株的基因组DNA为模板进行PCR扩增，然后利用PstI限制性内切酶对PCR扩增产物进行酶切。