[发明专利]一种血清亲细胞性免疫球蛋白E的定量检测试剂盒

说明书

本发明提供了一种血清亲细胞性免疫球蛋白E的定量检测试剂盒，包括如下试剂，亲合素预包被酶标反应板、生物素标记重组人FcεRⅠ‑α亚基、酶标记抗体；本发明基于受体‑待检IgE分子‑抗IgE抗体分析模式，利用受体作为捕获分子，能够捕获具有亲细胞活性IgE分子，从而致使检测结果具有生物活性的意义，更好指导临床的诊断和治疗。

技术领域

本发明属于血清免疫球蛋白E(IgE)分析技术领域，尤其是涉及一种血清亲细胞性免疫球蛋白E的定量检测试剂盒及方法，具体指能够与肥大细胞或嗜碱性粒细胞结合的、具有亲细胞活性的IgE(Cyto-IgE)蛋白水平的定量分析。

背景技术

在正常情况下，人体免疫系统对病原体发生免疫应答，诱导机体产生对病原体的抵抗能力，从而保护机体免受感染性疾病的困扰。但是，在异常情况下，某些特殊个体对吸入性物质(如花粉)或食入性食物(如牛奶)，产生不利于人体健康的免疫应答，导致人体不适，如皮疹、哮喘、肠胃炎、甚至过敏性休克危及生命，临床称之为“变态反应性疾病”。临床绝大多数变态反应性疾病的发生机制是由免疫球蛋白E(IgE)类抗体介导的，肥大细胞或嗜碱性粒细胞参与。免疫球蛋白E抗体(IgE)具有亲细胞性，其Fc段与肥大细胞或嗜碱性粒细胞表面受体(FcεR)结合，致使肥大细胞或嗜碱性粒细胞致敏。处于致敏状态的细胞，如遇到相应过敏原物质，位于细胞表面的IgE抗体通过可变区(VH/VL)结合相应抗原表位，形成“抗原桥”产生级联反应，致使细胞脱颗粒释放生物活性介质，活性介质作用于靶组织或器官导致临床症状。

变态反应性疾病的临床诊断主要依靠病史和过敏原确认，而血清IgE定量分析同样是临床诊断的重要指标。血清IgE定量分析可作为变态反应性疾病的初筛试验，也可作为过敏性疾病鉴别诊断的重要指标。

研究表明，免疫球蛋白E抗体(IgE)是介导变态反应性疾病的主要免疫球蛋白。体内IgE部分分布于血清中处于游离状态(Free-IgE)，部分与肥大细胞或嗜碱性粒细胞结合，处于结合状态(Binding-IgE)。致敏机体再次遇到过敏原，结合状态IgE抗体，与过敏原结合致使变态反应的发生导致临床症状，换言之，结合状态IgE(Binding-IgE)是直接与变态反应疾病相关的抗体状态。

目前，血清免疫球蛋白E定量检测方法主要包括散射免疫比浊法和发光免疫分析方法。免疫比浊法采用抗人IgE抗体包被的乳胶微球作为主要试剂，与血清中待检IgE结合，造成乳胶微球交联致使散射光发生改变，通过检测散射光强度获得待检血清标本IgE的水平。而在发光免疫分析中，无论是化学发光还是电化学发光，一般采用双抗体夹心模式，即采用一对抗人IgE抗体分别作为捕获抗体(与固相载体连接)和标记抗体(与发光剂偶联)，待检IgE分子与两种试剂形成“双抗体夹心”复合物，通过检测标记物信号获得待检血清标本IgE的水平。无论免疫比浊法，还是双抗体夹心法，二者均采用特异性抗体(抗人IgE抗体)作为识别受体，与待检IgE分子结合，即将待检IgE分子视为“蛋白”来检测的，不能反映待检IgE作为功能性分子(结合细胞)来检测的。因此，目前检测方法存在某些缺陷，即不能反映待检IgE抗体在体内的生物活性，从而导致检测结果与临床症状有时存在矛盾的现象。

发明内容

基于目前血清IgE抗体检测方法采用免疫化学分析原理，存在不能反映于人体内的亲细胞活性、不能反映体内真实生物活性的不足，本发明基于受体-待检IgE分子-抗IgE抗体分析模式，利用重组人FcεRⅠ-α亚基作为捕获分子，能够捕获具有亲细胞活性IgE分子，从而致使检测结果具有生物活性的意义，更好指导临床的诊断和治疗。

为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：

本发明提供重组人FcεRⅠ-α亚基在血清亲细胞性免疫球蛋白E的定量检测试剂盒中的应用。

本发明同时提供一种血清亲细胞性免疫球蛋白E的定量检测试剂盒，包括如下试剂，亲合素预包被酶标反应板、生物素标记重组人FcεRⅠ-α亚基、酶标记抗体。