[发明专利]大花胡麻草克服烧尖坏死提高人工快繁效率的方法

权利要求书

1.大花胡麻草克服烧尖坏死提高人工快繁效率的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)外植体的获取：选择生长势好、无病虫害、无畸形的健壮植株，取其茎尖下茎段；

(2)将步骤(1)的带节茎段进行消毒处理；

(3)诱导腋芽萌发、基茎丛生芽发生和增殖：将经过步骤(2)消毒灭菌好的外植体以插入的方式接入下列培养基A中，所述培养基A，包括以下原料：

MS基本培养液

6-苄氨基嘌呤 1.5-2.0 mg/L

萘乙酸 0.1-0.5 mg/L

活性炭 500 mg/L

蔗糖 30000 mg/L

果糖 500 mg/L

琼脂粉 5000 mg/L

控制光照度、温度、光照时间的条件下进行愈伤组织和腋芽萌发诱导；

(4)消除烧尖坏死及增殖培养：在步骤(3)培养基A中继代增殖后，将步骤(3)中培养的增殖苗转接至下列培养基B中，所述培养基B，包括以下原料：

改良的MS基本培养液：硝酸钾、磷酸二氢钾、2水合氯化钙增加至原来的1.5倍，其余成分不变

6-苄氨基嘌呤 1.5-2.0 mg/L

萘乙酸 0.1-0.5 mg/L

赤霉素 5.0-10.0 mg/L

硫酸腺嘌呤 100 mg/L

蔗糖 30000 mg/L

果糖 500 mg/L

活性炭 500 mg/L

琼脂粉 5000 mg/L

控制光照度、温度、光照时间的条件下进行增殖培养；

(5)将增殖芽丛按生长周期轮流接入步骤(3)和步骤(4)培养基中，在保持增殖系数的同时又有效克服了烧尖坏死的发生，其中，培养基A和培养基B轮流使用；

(6)取步骤(5)中培养基B中的增殖苗接种于下列培养基C中，所述培养基C，包括以下原料：

1/2改良的MS基本培养液：硝酸钾、磷酸二氢钾、2水合氯化钙增加至原来的1.5倍，其余成分不变

萘乙酸 1.0-1.5 mg/L

多效唑 8.0-10.0 mg/L

活性炭 500 mg/L

蔗糖 30000 mg/L

果糖 500 mg/L

琼脂粉 5000 mg/L

控制光照度、温度、光照时间的条件下获得根系发达、苗矮壮的试管苗；

(7)炼苗和移栽：取步骤(6)中生根瓶苗置于室温下炼苗，从培养基C中取出幼苗，将残留培养基清洗干净，放入多菌灵溶液中消毒，后移栽至经高锰酸钾消毒的腐殖质中保温保湿培养，即得移栽苗。

2.根据权利要求1所述大花胡麻草克服烧尖坏死提高人工快繁效率的方法，其特征在于，步骤(2)中所述带节茎段进行消毒处理的方法为：先用自来水清洗表面灰尘和杂物，再用质量比为10％的洗衣粉溶液浸泡10 min并轻微震荡搅动后流水冲洗30 min，置于超净工作台上用体积比为75％的酒精消毒15 s，再用质量百分比为0.1％的HgCl₂灭菌6 min，最后无菌水冲洗5-6次，每次不低于3min，在整个消毒过程中充分摇动器皿，最终得到消毒灭菌处理的外植体。

3.根据权利要求1所述大花胡麻草克服烧尖坏死提高人工快繁效率的方法，其特征在于，所述培养基A的pH值为5.4-5.6。

4.根据权利要求1所述大花胡麻草克服烧尖坏死提高人工快繁效率的方法，其特征在于，所述培养基B的pH值为5.4-5.6。

5.根据权利要求1所述大花胡麻草克服烧尖坏死提高人工快繁效率的方法，其特征在于，所述培养基C的pH值为5.4-5.6。