[发明专利]一种霉酚酸检测试剂及其制备方法

说明书

本发明涉及一种霉酚酸检测试剂及其制备方法。具体地，本发明提供一种霉酚酸检测试剂，所述的检测试剂包括试剂R1和试剂R2；所述的试剂R1包括第一缓冲液、次黄嘌呤(IMP)、II型次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH II)和抗氧化剂；所述的试剂R2包括第二缓冲液和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)；所述的试剂R1和试剂R2的体积比为(3‑15)：1。本发明所述的霉酚酸检测试剂可通过开放平台通用型生化仪对血浆中的霉酚酸进行检测，具有抗干扰能力强、线性良好、稳定性强和测定结果准确等优点，且操作简单，能够进行大批量工业化生产。

技术领域

本发明属于医学检验领域，具体地涉及一种霉酚酸检测试剂及其制备方法。

背景技术

霉酚酸(mycophenolic acid,MPA)是免疫抑制药物霉酚酸酯(Mycophenolatemofetil,MMF)经代谢产生的活性物质，能抑制嘌呤核苷酸从头合成途径的关键限速酶次黄嘌呤核苷磷酸脱氢酶(inosine monophosphate dehydrogenase,IMPDH)活性，减少鸟嘌呤核苷酸的合成，从而选择性抑制T淋巴细胞、B淋巴细胞的增殖和功能。一般情况，口服MMF后约1～2h，MPA含量达到峰值，之后经肝代谢，绝大部分代谢产物随胆汁排入小肠，在肠道细菌作用下重新转化为MPA，约10～12h出现第二次血药浓度高峰，其半衰期为16～17h。由于MPA代谢产物主要经肾排出，严重肾功能不全者应减少MMF用量，另外药代动力学实验显示受患者体质及联用的免疫抑制药物种类可影响MPA代谢，且波动范围较大。临床研究表明同时对MPA和钙调神经磷酸酶抑制剂(环孢霉素或他克莫司)进行药物浓度检测，可以扩大药物治疗效果，并最大程度减少其副作用，同时保证用药安全和疗效。

人II型次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDHII)是核苷酸从头合成过程中一种重要的酶，在体内可以与次黄嘌呤(IMP)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)形成复合物，将NAD还原为NADH，同时将IMP转化为XMP，并先后释放NADH和XMP。

MPA存在时，可非竞争地结合IMPDHII，导致XMP不能释放，抑制酶促反应进行。其反应产物NADH可在340nm波长下被检测，当血清或血浆样本中存在MPA时，NADH的生成受到抑制。MPA的浓度与NADH的生成成反比，通过在340nm处测定NADH吸光度的变化值，即可测得样本中霉酚酸的含量。利用该原理制可以对样本中的霉酚酸进行测定。

目前监测霉酚酸血药浓度主要使用高效液相色谱法、酶放大免疫测定法、化学发光法、免疫比浊法等方法，但这些检测方法往往使用昂贵的检测仪器，处理过程复杂，对操作人员专业性要求较高，临床使用有限。例如现有技术中的已有的可用于检测霉酚酸检测的罗氏试剂，虽然能够测定样本中霉酚酸的含量，但该罗氏时间不仅需要保存在特殊的容器(如图1所示)中，而且还需要与特定的仪器(如特定的cobasc501、cobasc502、cobasc311仪器)配合才能用于测定霉酚酸，这种的特殊的容器和特定的仪器价格昂贵，且很多医院、研究所等机构没有适用于罗氏试剂的特定仪器，只有通用型生化仪，因此，很多医院、研究所等机构无法使用罗氏试剂来测定霉酚酸，大大限制了对样本中霉酚酸的测定。

因此，本领域需要开发一种霉酚酸检测试剂，该霉酚酸检测试剂可通过通用型生化仪对样品(如血浆中)霉酚酸进行准确、快速和简单的测定。

发明内容

本发明的目的在于提供一种霉酚酸检测试剂，该霉酚酸检测试剂可通过通用型生化仪对样品(如血浆中)霉酚酸进行准确、快速和简单的测定。

本发明的第一方面，提供一种霉酚酸检测试剂，所述的检测试剂包括试剂R1和试剂R2；

所述的试剂R1包括第一缓冲液、次黄嘌呤(IMP)、II型次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDHII)和抗氧化剂；

所述的试剂R2包括第二缓冲液和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)；