[发明专利]一种提高藻红蛋白产量的制备方法有效
申请号: | 201910863101.4 | 申请日: | 2019-09-12 |
公开(公告)号: | CN112481339B | 公开(公告)日: | 2022-04-19 |
发明(设计)人: | 李孟洲;黄晋毅;张富杰;叶翰扬;陈奕荣 | 申请(专利权)人: | 台湾海洋大学 |
主分类号: | C12P21/02 | 分类号: | C12P21/02;C12N1/20;C12R1/89;C12R1/01 |
代理公司: | 北京同达信恒知识产权代理有限公司 11291 | 代理人: | 丁睿 |
地址: | 中国台湾*** | 国省代码: | 台湾;71 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 蛋白 产量 制备 方法 | ||
本发明提供一种提高藻红蛋白产量的制备方法,包括步骤一、混合顶丝藻、含游海假交替单胞菌的发酵菌液及海水,得顶丝藻菌液混合物;步骤二、将所述顶丝藻菌液混合物在一时间条件、一温度条件及一转速条件下发酵,使顶丝藻破碎释出藻红蛋白;本发明另提供一种细菌用于破碎顶丝藻的用途。
技术领域
本发明是关于一种提高藻红蛋白产量的制备方法,特别是关于利用细菌发酵来提高藻红蛋白产量的制备方法。
背景技术
藻红蛋白(Phycoerythrin,PE)为藻胆蛋白(Phycobiliprotein)的一种,其为蓝绿藻、红藻、隐藻等藻类用于补光的光合色素蛋白。藻红蛋白因其光谱及荧光特性,已广泛被用于与荧光标记相关的应用中,诸如生物指针试剂、化学药品制剂、体外诊断标记、荧光检测探针等。近年来,亦有藻红蛋白被应用于食品、化妆品和保健品中。
然而,藻红蛋白虽具高产业利用性,却有生产技术门坎较高、产量低,导致其相关应用产品成本过高的隐忧。因此,如何降低藻红蛋白的生产成本、提高藻红蛋白的产量即成为相关应用领域急需解决的问题。
专利CN104130319B公开了一种藻红蛋白的萃取方法,其包含先将红藻加入-50℃~-10℃的冰粉中,在1000r/min~3000r/min的搅拌速度条件下进行破壁处理,得到含有藻红蛋白的破壁液;接着将得到的含有藻红蛋白的破壁液进行分离、纯化和干燥,得到藻红蛋白成品。
目前,藻红蛋白的取得主要是以紫菜、仙菜藻等大型红藻为原料,先对红藻进行物理性处理,包含利用反复冻融、超音波破碎等方式释出藻红蛋白后,再使用硫酸铵沉淀、离子交换层析等方法分离纯化出藻红蛋白。然而,因大型红藻的藻体形态多为叶状体,要使其破碎释出藻红蛋白具有一定困难度。此外,大型红藻类的醣类含量高,此导致后续的分离纯化程序较为困难。因此如何有效地破碎红藻,以使藻红蛋白产量提升,即为本发明所属技术领域所面临的另一个问题。
发明内容
本发明的发明人发现,顶丝藻(Acrochaetium sp.)虽属于红藻类,但是不同于传统所使用的大型红藻,顶丝藻的醣类含量少,且藻体为丝状体,非常适合作为取得藻红蛋白的原料。使用顶丝藻作为原料制备藻红蛋白,具有分离纯化较简单的优势,若能进一步提高制备可得到藻红蛋白产量,将对藻红蛋白的市场应用有很大的帮助。
基于上述发现,本发明的目的在于提供一种提高藻红蛋白产量的制备方法,包括:
步骤一、混合顶丝藻、发酵菌液及海水,得顶丝藻菌液混合物;
步骤二、将所述顶丝藻菌液混合物在时间条件、温度条件及转速条件下发酵,使顶丝藻破碎释出藻红蛋白;
其中所述发酵菌液包含游海假交替单胞菌(Pseudoalteromonas haloplanktis);
其中所述时间条件为6-78小时,所述温度条件为20-25℃,所述转速条件为100-500rpm。
为达前述发明目的,其中所述发酵菌液的OD600值为0.9~1.1。
为达前述发明目的,其中所述发酵菌液的OD600值为1。
为达前述发明目的,其中所述温度条件为22℃。
为达前述发明目的,其中所述转速条件为300rpm。
为达前述发明目的,其中所述时间条件为6-36小时。
为达前述发明目的,其中所述时间条件为24-30小时。
为达前述发明目的,其中所述顶丝藻:所述发酵菌液:所述海水的混合比例为2(g):1(mL):1(mL)。
为达前述发明目的,其中所述海水为人工海水或天然海水。
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