[发明专利]一种快速纯化血清中IgG和IgE的方法在审
| 申请号： | 201910863313.2 | 申请日： | 2019-09-12 |
| 公开（公告）号： | CN110567787A | 公开（公告）日： | 2019-12-13 |
| 发明（设计）人： | 王彦波;傅玲琳;王翀 | 申请（专利权）人： | 浙江工商大学 |
| 主分类号： | G01N1/34 | 分类号： | G01N1/34 |
| 代理公司： | 35232 厦门创象知识产权代理有限公司 | 代理人： | 尤怀成;王凤玲 |
| 地址： | 310012 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 甘氨酸缓冲液 混合孵育 缓冲液 洗脱液 血清 洗脱 中和 琼脂糖凝胶 食物过敏原 亲和纯化 血清样品 再利用 构建 串联 检测 | ||
1.一种快速纯化血清中IgG和IgE的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将Protein G琼脂糖凝胶与血清混合孵育，以获得结合成分A和流穿成分B；
(2)将Protein L琼脂糖凝胶与所述流穿成分B混合孵育，以获得结合成分C和流穿成分D；
(3)将所述结合成分A用甘氨酸缓冲液洗脱，收集洗脱液，洗脱液用HEPES-Na缓冲液中和，以获得纯化IgG溶液；
(4)将所述结合成分C用甘氨酸缓冲液洗脱，收集洗脱液，洗脱液用HEPES-Na缓冲液中和，以获得纯化IgE溶液。
2.如权利要求1所述的快速纯化血清中IgG和IgE的方法，其特征在于，在所述步骤(1)中，Protein G琼脂糖凝胶与血清的体积比为2:1～5:1。
3.如权利要求1所述的快速纯化血清中IgG和IgE的方法，其特征在于，在所述步骤(1)中，混合孵育的温度为4℃，孵育时间为30～120min。
4.如权利要求1所述的快速纯化血清中IgG和IgE的方法，其特征在于，在所述步骤(2)中，Protein L琼脂糖凝胶与血清的体积比为1:5～1:20。
5.如权利要求1所述的快速纯化血清中IgG和IgE的方法，其特征在于，在所述步骤(2)中，混合孵育的温度为4℃，孵育时间为60～120min。
6.如权利要求1所述的快速纯化血清中IgG和IgE的方法，其特征在于，在所述步骤(3)和所述步骤(4)中，甘氨酸缓冲液浓度为100mmol/L，pH为2.0～3.0。
7.如权利要求1所述的快速纯化血清中IgG和IgE的方法，其特征在于，在所述步骤(3)和所述步骤(4)中，HEPES-Na缓冲液浓度为200～500mmol/L，pH为7.5～9.0。
8.如权利要求1所述的快速纯化血清中IgG和IgE的方法，其特征在于，所述血清为哺乳动物血清。
9.如权利要求1所述的快速纯化血清中IgG和IgE的方法，其特征在于，所述步骤(3)获得的IgG和所述步骤(4)获得的IgE用于抗原、过敏原的免疫学检测或者用于偶联磁珠亲和纯化抗原或过敏原。
10.如权利要求9所述的快速纯化血清中IgG和IgE的方法，其特征在于，所述免疫学检测包括ELISA、Western blot、dot blot、肥大细胞脱颗粒。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于浙江工商大学，未经浙江工商大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201910863313.2/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
