[发明专利]基于表面增强拉曼光谱的新型尿液中肌酐检测方法

权利要求书

1.一种基于表面增强拉曼光谱的新型尿液中肌酐检测方法，其特征在于：包括如下步骤：

(A)取正常尿液和待检测尿液，去除尿液中的尿素；

(B)向去除尿素后的正常尿液中加入肌酐粉末，制作标准浓度肌酐样本；

(C)SERS基底合成；

(D)采集肌酐样本和去除尿液的待检测尿液在SERS基底上反应后的SERS光谱，对光谱数据进行处理得到待检测尿液中的肌酐浓度。

2.如权利要求1所述的基于表面增强拉曼光谱的新型尿液中肌酐检测方法，其特征在于：所述的步骤A中，按如下步骤去除尿液中的尿素：

(A1)收集人的24小时尿液；

(A2)制备浓度均为0.6M的盐酸溶液和亚硝酸钠溶液；

(A3)将步骤A1中的尿液和步骤A2中的盐酸溶液、亚硝酸钠溶液按照1:1:1的体积比于离心管中混合，并放在超声波清洗机中超声5～10分钟进行充分混合；

(A4)充分混合后将溶液放在冰水中于0～4℃条件下反应2小时以上。

3.如权利要求1所述的基于表面增强拉曼光谱的新型尿液中肌酐检测方法，其特征在于：所述的步骤B中，按如下步骤制作肌酐样本：

(B1)分别取一定量去除尿素后的正常尿液于离心管中；

(B2)再称取不同重量的肌酐粉末分别加入离心管中，获得不同浓度的去除尿素后的正常尿液中肌酐样本；

(B3)将离心管放在超声清洗机中超声20～40min，使肌酐粉末在去除尿素后的正常尿液中充分溶解混匀后放在冰箱中储存备用，冰箱内的温度为0～4℃。

4.如权利要求3所述的基于表面增强拉曼光谱的新型尿液中肌酐检测方法，其特征在于：所述的步骤B1中，分别于7个5mL的离心管中加入2mL去除尿素后的正常尿液；所述的步骤B2中，分别称取0.0004g、0.0008g、0.0012g、0.0016g、0.0020g、0.0024g、0.0028g的肌酐粉末加入步骤B1中的7个离心管中，获得浓度为200、400、600、800、1000、1200、1400mg/L去尿素尿液的肌酐样本。

5.如权利要求1所述的基于表面增强拉曼光谱的新型尿液中肌酐检测方法，其特征在于：所述的步骤C中，按如下步骤进行SERS基底合成：

(C1)配置所需试剂；

(C2)制备晶种溶液；

(C3)合成母液并加入晶种溶液；

(C4)放在水浴锅中静置24h生长成金纳米棒；

(C5)取金纳米棒溶液进行清洗后，滴在硅片上成膜制得SERS基底。

6.如权利要求5所述的基于表面增强拉曼光谱的新型尿液中肌酐检测方法，其特征在于：所述的步骤C1中，按如下步骤制备所需试剂：

(C11)将1g四水氯金酸粉末加入100mL棕色定量瓶中，加超纯水至刻度100mL，充分混匀溶解12h以上，获得浓度为1％的HAuCl4溶液；

(C12)用量筒量取100mL超纯水于带有磁子的250mL锥形瓶中，称取7.65345g十六烷基三甲基溴化铵粉末加入锥形瓶中，再量取110mL超纯水缓慢加入锥形瓶中，中间不要产生泡沫，将该锥形瓶放入温度为40～45℃的烘箱中使得十六烷基三甲基溴化铵粉末溶解，直至锥形瓶底部没有块状晶体，获得CTAB溶液；

(C13)称取0.135896g硝酸银粉末于100mL棕色定量瓶中，加入超纯水至刻度100mL进行溶解，获得浓度为0.008M的AgNO3溶液；

(C14)称取0.8806g的L-抗坏血酸粉末于50mL棕色定量瓶中，加入超纯水至刻度50mL进行溶解，获得浓度为0.1M的AA溶液；

(C15)称取0.0189g硼氢化钠粉末于50mL棕色定量瓶中，加入冰水至刻度50mL进行溶解，获得浓度为0.01M的NaBH4溶液，用封口胶封住瓶口；

(C16)在100mL棕色定量瓶中加入13.234mL质量分数为68％的硝酸，加入超纯水至刻度100mL稀释，获得浓度为2M的硝酸溶液；

以上所有溶液，除CTAB溶液外均放在冰箱中储存备用，冰箱内的温度为0～4℃；所述的NaBH4溶液有效时间为1小时。