[发明专利]一种五味子甲素纯度标准物质及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了五味子甲素纯度标准物质的制备方法。制备方法包括：从五味子药材中提取制备五味子甲素纯度标准物质的候选物；候选物的纯度分析和结构鉴定；候选物的均匀性检验；候选物的稳定性检验；候选物的纯度定值检测；不确定度评定；若纯度分析、结构鉴定、均匀性检验、稳定性检验和不确定度评定均满足要求，则制得五味子甲素纯度标准物质。本发明还提供由上述方法制备得到的五味子甲素纯度标准物质及其应用。本发明的五味子甲素纯度标准物质能作为标准物质用于准确检测由五味子和南五味子作为原料生产的相关产品中五味子甲素成分含量，为实现我国准确定量五味子甲素成分含量提供了具备可溯源性和量值传递功能的标准物质资源。

技术领域

本发明涉及一种五味子甲素纯度标准物质及其制备方法与应用，属于化学计量中标准值传递技术领域。

背景技术

五味子和南五味子都有收敛固涩，益气生津，补肾宁心等作用。五味子和南五味子含有多种化学成分，其中联苯环辛烯类木脂素是其主要活性成分，而五味子甲素是其中一个重要的活性成分。五味子甲素(Schisandrin A)为白色结晶粉末状，CAS登记号为61281-38-7，分子式为C₂₄H₃₂O₆，相对分子量为416.51，溶于氯仿、甲醇、乙酸乙酯、丙酮，不溶于水。研究发现，五味子甲素表现出多种良好的药理活性作用，比如抗肝纤维化、抑制多重耐药大肠杆菌生长、防治老年痴呆、糖尿病、防治肥胖、拮抗甲醛细胞毒性、抗抑郁等，是一种优秀的潜在药物。

目前，针对五味子甲素的制药用途开发、五味子及其相关产品的质量控制研究遇到了一些难题，其中一个主要原因是：五味子甲素纯度标准物质的缺乏，已影响五味子及其相关产品的标准制定和已有标准的开展执行，影响到了五味子甲素的制药研究的进展。五味子甲素纯度标准物质的研制体系尚未见报道。国内医药行业大都使用国外的相关标准品，但这些国外的相关标准品不仅价格昂贵、采购周期长、而且大都不具溯源性，无法有效实现对检测方法的验证和检测结果的仲裁，难以满足对五味子及其相关产品的制药研发的需求。为了保证测量结果的可溯源性及量值准确可靠，本领域急需配套相应的五味子甲素纯度标准物质。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于，克服现有技术的缺陷，提供一种五味子甲素纯度标准物质的制备方法。

本发明的第二方面，提供一种五味子甲素纯度标准物质。

本发明的第三方面，提供一种五味子甲素纯度标准物质的应用。

为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案为：

一种五味子甲素纯度标准物质的制备方法，包括：

1)从五味子药材中提取制备五味子甲素纯度标准物质的候选物；

1a.提取：将五味子药材粉碎，按质量比加入5～50倍的甲醇作为提取溶剂，于60℃至回流温度下提取1～10h，得提取液；

1b.萃取：将提取液浓缩除去提取溶剂，加入0.5～5倍体积的正己烷萃取1～3次，合并正己烷层，得萃取液；

1c.正相硅胶柱层析：将萃取液浓缩，上样，采用硅胶柱层析，用体积比正己烷：乙酸乙酯＝6:1进行洗脱，合并含五味子甲素的洗脱液，浓缩，得浓缩物；

1d.结晶：将浓缩物按每克加入0.2～1L甲醇并在加热下溶解，放置后有无色晶体析出，过滤；将过滤得到的晶体再按每克加入0.2～0.5L甲醇在加热下溶解，放置重结晶，过滤，真空干燥，即得五味子甲素候选标准物质；

2)候选物的纯度分析和结构鉴定：确认该候选物是否是五味子甲素，确认该候选物的纯度是否不低于99％；如果纯度分析和结构鉴定符合要求，则进行均匀性检验；

3)候选物的均匀性检验：如果候选物均匀性满足要求，则进行稳定性检验；