[发明专利]一种眼部干细胞培养液

说明书

本发明提供的一种眼部干细胞培养液属于生物技术领域，一种眼部干细胞培养液由低糖型MEM培养基、胎牛血清、非必须氨基酸、血管内皮生长因子、生长激素释放抑制因子和血小板来源增殖因子混合制备而成，该眼部干细胞培养液可以使得眼部干细胞具有较强的增值能力和成纤维分化潜能，有利于眼部细胞的再生。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种眼部干细胞培养液。

背景技术

角膜外伤是眼科临床常见疾病，严重时甚至可以致盲。正常的角膜上皮化过程是通过角膜缘上皮基底层干细胞的再生分化完成的。角膜损伤导致角膜上皮缺损，继发的炎症反应会影响干细胞增生和迁移，形成血管翳，加重角膜水肿与瘢痕化，角膜浑浊影响透光，甚至造成角膜溃疡。角膜移植目前仍是临床角膜盲唯一可靠有效的治疗手段。角膜供体一般来源于角膜捐献者，一方面捐献者数量有限，另一方面同种异体角膜移植仍然存在术后免疫反应，甚至出现供体排斥而致手术失败。

干细胞再生医学研究的兴起为角膜损伤的修复提供了新的治疗途径，其基本方法是将体外培养扩增的自体正常组织细胞，例如角膜缘干细胞、结膜上皮细胞、口腔黏膜细胞等，吸附于一种生物相容性良好并可被机体降解吸收的生物支架，植入机体角膜部位，在支架材料逐步降解过程中，细胞继续增殖并分泌基质，最终形成相应组织，达到促进角膜上皮再生，修复角膜缺损并重现视力功能的目的。

脂肪源性干细胞(adipose-derivedstemcells，ASCs)是存在于脂肪组织中的一群具有多向分化潜能的成体干细胞，在体外能够自我更新、不断增殖，而且可诱导分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、骨骼肌细胞、血管内皮细胞、心肌细胞及神经细胞等多种类型的细胞。因具有来源丰富、易于培养、多向分化等特点，ASCs在组织创伤修复领域具有良好的应用前景和科研价值。而ASCs在体外培养过程中，会分泌多种生物活性因子，通过旁分泌机制，促进组织创伤的修复。因此，ASCs的条件培养液也具有广阔的临床应用前景。

眼部整形手术是我国整形外科领域开展最广泛的手术，术中通常会去除部分多余的眼眶脂肪。这种手术切除的眼眶脂肪通常被视为“废物”而丢弃。医学研究认为，在胚胎发育过程中，皮下脂肪与内脏脂肪发生于中胚层。而眼眶脂肪则不同，是与眼周组织(包括角膜、结膜、眼球、眼外肌肉与骨骼)一起从外胚层发育而来的。因此，本发明研究人员通过研究发现，眼眶脂肪来源的ASCs在体外培养分化过程中，其分泌的各种细胞因子和生长因子可能会对角膜上皮细胞的生长和修复起到重要作用。

发明内容

本发明提供了一种眼部干细胞培养液，该眼部干细胞培养液可以使得眼部干细胞具有较强的增值能力和成纤维分化潜能，有利于眼部细胞的再生，本发明的具体方案如下：

本发明的目的在于提供一种眼部干细胞培养液，其技术点在于：所述的眼部干细胞培养液包括的组分有：低糖型MEM培养基、胎牛血清、非必须氨基酸、血管内皮生长因子、生长激素释放抑制因子和血小板来源增殖因子。

在本发明的有的实施例中，每1L所述的低糖型MEM培养基包括以下组分含量为：

胎牛血清 0.8~1.2L

非必须氨基酸 5~30g

血管内皮生长因子 0.5~2.5mg

生长激素释放抑制因子 0.25~0.4mg

血小板来源增殖因子 0.5~2mg。

在本发明的有的实施例中，所述的低糖型MEM培养基的制备方法如下：