[发明专利]一种总铁结合力检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明涉及生物技术领域，涉及一种总铁结合力检测试剂盒，尤其涉及一种总铁结合力检测试剂盒的制备方法，包括试剂R1的制备以及试剂R2的制备，将配液罐放在磁力搅拌器上，使溶液保持中速转动状态，边搅拌边投入Tris缓冲液、亚铁嗪、抗坏血酸、第二缓冲液，搅拌30分钟至物料完全溶解，溶液清澈透明配液罐底部无沉淀后，然后定容至最终体积。本发明的优点是：本试剂盒是采用分光光度法以亚铁嗪为底物进行总铁结合力的检测，在酸性介质中与转铁蛋白结合的血清铁从转铁蛋白中解离出来,再被还原剂还原为Fe2+,后者与亚铁嗪生成紫红色化合物,通过分光光度计检测562nm处吸光度值检测血清、血浆样品中的总铁含量,线性范围可做到50‑400μmol/L。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，涉及一种总铁结合力检测试剂盒，尤其涉及一种总铁结合力检测试剂盒的制备方法。

背景技术

总铁结合力的测定是常规检验项目，众多临床资料表明，缺铁性贫血、急性肝炎等疾病导致总铁结合力降低，而肝硬变，肾病，尿毒症和血色沉着症等疾病可导致总铁结合力增高，测定总铁结合力的含量，对相关疾病的确诊、治疗效果的观察具有重要的临床价值。

目前，临床测定总铁结合力主要采用经轻质碳酸镁吸附的原子吸收法和各种络合光度法。原子吸收法不仅需要专用昂贵仪器，还需沉淀、离心，检测成本高，操作步骤繁琐，临床上难以普及。

发明内容

本发明的目的是：针对上述不足，提供一种总铁结合力检测试剂盒及其制备方法。

为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：

一种总铁结合力检测试剂盒，包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1的各组分及浓度包括：

所述试剂R2的各组分集浓度包括：

所述第一防腐剂和第二防腐剂包括叠氮钠、Proclin-950、Proclin-300、硫柳汞中的一种。

所述试剂R1的pH值在4.00-5.00之间。

所述试剂R2的pH值在7.00-8.30之间。

一种总铁结合力检测试剂盒的制备方法，包括如下步骤：A)、试剂R1制备：

在配液罐中加入70％的纯化水，将配液罐放在磁力搅拌器上，打开磁力搅拌器电源开关，调节搅拌子至中档转速，使溶液保持中速转动状态，边搅拌边投入Tris缓冲液、硫脲、盐酸羟胺、硫酸亚铁铵、TritonX-100、第一防腐剂，搅拌10-30分钟至全部物料完全溶解，溶液清澈透明配液罐底部无沉淀后，调节pH值到4.00-5.00之间，然后定容至最终体积；

溶解完的配液按照微孔过滤器操作规程，通过微孔滤膜过滤，过滤后的溶液存放在成品罐中，进行标识；

B)、试剂R2制备：

在配液罐中先加入70％的纯化水，将配液罐放在磁力搅拌器上，打开磁力搅拌器电源开关，调节搅拌子至中档转速，使溶液保持中速转动状态，边搅拌边投入Tris缓冲液、亚铁嗪、抗坏血酸、第二缓冲液，搅拌10-30分钟至物料完全溶解，溶液清澈透明配液罐底部无沉淀后，调节pH值到7.00-8.30之间，然后定容至最终体积；

溶解完的配液按照微孔过滤器操作规程，通过微孔滤膜过滤，过滤后的溶液存放在成品罐中，进行标识。

与现有技术相比，本发明所达到的技术效果是：本试剂盒是采用分光光度法以亚铁嗪为底物进行总铁结合力的检测，在酸性介质中与转铁蛋白结合的血清铁从转铁蛋白中解离出来,再被还原剂还原为Fe2+,后者与亚铁嗪生成紫红色化合物,通过分光光度计检测562nm处吸光度值检测血清、血浆样品中的总铁含量,线性范围可做到50-400μmol/L。