[发明专利]粪菌移植胶囊的制备方法

说明书

“粪菌移植”(Fecal microbiota transplantation，FMT)是指将健康人粪便中的功能菌群，移植到患者胃肠道内，重建新的肠道菌群，实现肠道及肠道外疾病的治疗。一些中药的有效成分例如马齿苋多糖具有扶植肠道正常菌群生长，调整菌群失调，防治感染的作用，是理想的中药微生态调节剂。本发明利用粪菌移植供体的健康优质粪便，在体外模拟肠道微生物对中药的酶解作用，通过适当的发酵条件，获得马齿苋的有效成分，继而发挥改善肠道微生态的作用，使供体菌群更加健康。将粪菌发酵液制成粪菌胶囊，用于临床的粪菌移植治疗。

技术领域

本发明属于人粪菌移植、发酵、中药领域，涉及粪菌移植胶囊的制备方法。

背景技术

“粪菌移植”(Fecal microbiota transplantation，FMT)是指将健康人粪便中的功能菌群，移植到患者胃肠道内，重建新的肠道菌群，实现肠道及肠道外疾病的治疗。粪菌移植作为重建肠道菌群的有效手段，已用于难辨梭状芽孢杆菌感染、炎症性肠病、顽固性便秘、代谢病、肠道免疫缺陷、肠道过敏等多种菌群相关性疾病的治疗和探索性研究，并被认为是近年的突破性医学进展。

粪菌给入途径分为上消化道、中消化道、下消化道三种途径。上消化道途径主要指口服粪菌胶囊；中消化道途径包括通过鼻肠管、胃镜钳道孔、经皮内镜胃造瘘空肠管；下消化道途径包括结肠镜、灌肠、结肠造瘘口、以及经内镜肠道植管术(transendoscopicenteral tubing，TET)等。医生应针对患者的不同情况和各种途径的特点选择其最合适的输入途径。

粪菌移植的状态可分为新鲜、冻存和发酵三种形式。由于粪菌移植的安全性成为临床决策的首要考虑因素，因此，为了分离一份优质的不含病菌的粪菌群，对捐粪者的要求很高，至少近3-6个月内没有发生腹泻、没有使用过抗生素，而且必须没有传染病和胃肠道疾病，另外，还有包括年龄、生理、病理、心理、诚信、时间、环境等方面的限制条件。

如何进行粪菌移植更好的有助于人体使用，是需要不断优化研究的方向。

发明内容

本发明的目的在于提供粪菌移植胶囊的制备方法：

本发明的目的通过下述技术方案实现：

(1)将供体新鲜粪便样本置于搅拌器中，通入氮气，维持低氧环境(氧气含量体积比不超过3％)，加入0.9％无菌NaCl溶液2000r/min均质3min，获得粪便浆体；

(2)将粪便浆体经5.0mm的不锈钢滤网过滤去除其中的大颗粒物质，获得初滤后的粪便浆体；

(3)将粪便浆体加入到初滤后的粪便浆体冰上转运至实验室并在采集后2h内进行处理；将粪便浆体以及马齿苋粉末倒进发酵罐中，厌氧发酵，料液比1:20，发酵温度为37℃，搅拌转速200r/min，初始PH值为6.8，12h后获得粪菌发酵浆体；

(5)粪菌发酵浆体逐级经过直径2.0mm、1.0mm、0.5mm和0.25mm的不锈钢滤网过滤，以去除食物残渣和小颗粒物质，获得粗粪菌发酵液；

(6)将粗粪菌液以6000r/min的速率离心15min，并将粪菌沉淀再悬浮于100倍粪菌重量的0.9％NaCl溶液中，得近无色无味的含有马齿苋有效成分的粪菌发酵液。

(7)将(6)中的粪菌发酵液灌装进结肠溶性胶囊壳，制成粪菌移植胶囊，冷冻保存。

其中，

步骤(1)所述供体新鲜粪便和NaCl溶液的重量比为：m_{供体新鲜粪便}∶m_NaCl溶液＝1∶5。

步骤(3)所述马齿苋粉末为中药马齿苋粉碎处理得到，操作步骤为：将马齿苋(市售产品，购于北京同仁堂药房)用中药粉碎机粉碎，过80目筛，封口袋密封保存；

本发明的技术原理：