[发明专利]一种牛樟芝固态培养基的制备方法

说明书

本发明公开了一种牛樟芝固态培养基的制备方法，粉碎牛樟树下角料后与营养成分混合均匀，再加水调整后采用机制木炭机进行制棒；用抛光麻布轮打磨木棒的表层炭化部分。或者选用整木作为基材，在横截面上设置若干个孔；将粉碎的牛樟树下角料与营养成分混合均匀制棒；打磨木棒的表层炭化部分后将其塞入椴木孔中，整体密封杀菌冷却；在无菌条件下，将菌液倒入木棒上面的凹槽中，用透气膜对塑料袋封口后，暗培养后收集牛樟芝子实体。本发明采用了牛樟树的下脚料，降低成本、培养基成分和牛樟树椴木更接近，牛樟芝品质更好，且成本远远低于牛樟树椴木培养法。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，涉及一种真菌的新的培养方法，具体涉及一种 牛樟芝固态培养基的制备方法。

背景技术

牛樟芝(Antrodia cinnanonea)，又名樟芝、樟菇、血灵芝、灵芝之王等， 现代药理学试验研究表明，樟芝具有抗癌、保肝、抗炎、免疫调节、神经保护等 药理作用。目前，从樟芝中分离得到的化学成分已超过200种，包括烷醛、芳香 烃、羧酸、脂肪酸酯、腺苷、精油、多糖、三萜等，其中，三萜类为樟芝的主要 活性成分。牛樟树的稀缺和牛樟芝生长缓慢且具有良好的药理活性引起了人们开 始研究如何人工培养牛樟芝。常见的牛樟芝人工培养技术有：椴木培养法，固态 发酵培养法和液态发酵培养法。这三种人工培养方法得到的牛樟芝中，椴木法培 养的牛樟芝最接近野生牛樟芝的品质。固态发酵法包括袋料培养法和培养皿培养 法，代料培养法由于培养基吸水后松散的特性导致牛樟芝很难长出子实体，导致 产出的牛樟芝主要活性成分的部分缺失。培养皿培养法则是由于培养基的养分被 快速消耗同样导致只有菌丝体的生长，难以长处牛樟芝子实体。液态发酵培养法， 可以大量快速的生长出牛樟芝菌丝，但是此方法培养的牛樟芝不含有牛樟芝的最 主要的活性物质。所以牛樟芝发展的重点是在保证产品品质的前提下，解决牛樟 树培养料的问题。国内目前已开始种植牛樟树苗，但距离可以使用还需15年以 上。目前同样也有采用其他树种来代替牛樟树去培养牛樟芝，多用香樟树、杉木 等作为培养基，此方法解决了牛樟树的限制问题，但是此方法会带入很多萘、黄 樟素、杉木树脂等有害成分。经检索发现，目前已有下列相关技术的报道。

CN104322279A季延滨在专利一直椴木培养牛樟芝的方法中采用在无菌环 境中，将牛樟芝菌种接入位于培养皿中的培养基上，制取牛樟芝菌液；将牛樟树 枯萎的椴木浸泡在牛樟芝菌液中50-60小时；将椴木放置在无菌环境中，给于所 需的温度，湿度，光照等条件，生长周期在6-8个月。此虽然生长周期相对野生 条件下缩短了，但是需要整块的牛樟树。

CN104472226A季延滨在专利一种牛樟芝培养方法中采用了菌袋制作的方 法，采用对桑枝屑加水和酶解，加入复合酶制剂并拌匀，在室温下进行酶解，酶 解后加入葡萄糖、蛋白胨、大麦提取物、酵母萃取物，固化剂，混合后凝结成主 体培养基，在无菌条件下接种，培养四个月。此方法的培养基的密度不够，根据 经验和相关报道此方法难以长出牛樟芝子实体，只能长出牛樟芝的菌膜，因此牛 樟芝的品质会与椴木培养的牛樟芝相差很大。

CN104541977A张绪璋等在一种牛樟芝的杉木板培养方法中采用了制备一 个杉木板的方法，以杉木板为载体，经过浸泡处理，打孔，在孔中加入菅养粉， 高温消毒，接种牛樟芝菌种培养。该方法加入的营养粉是类似于皿培的固体培养 基，质地非常疏松，极易被牛樟芝吸收利用消耗掉，虽然可以在较短时间内促进 牛樟芝菌丝体生长，但不利于牛樟芝子实体的形成。同时，该方法使用的杉木含 有树脂，会使产生的牛樟芝及其菌丝体携带杉木树脂，和用牛樟树栽培的牛樟芝 在品质上相差甚远。杉木质地较软，容易被消耗。因为孔径小，培养基中牛樟树 粉少，仅仅起到促进菌丝体前期生长速度的作用，对樟芝生长后期的有益功效产 物的积累影响较小，产出的樟芝品质无法和椴木牛樟树的相比。

CN104920063A朱永平在一种牛樟芝椴木栽培方法中采用将成熟的牛樟芝 干砍伐后，堆积，然后接种，生菌后，截成小块，埋木覆沙，此方法对椴木进一 步处理，使牛樟芝生长的更快速，但此方法依然属于椴木培养法，同样是有培养 成本高，且会造成木材的浪费。