[发明专利]一种基于UPLC-QTOF/MS检测芦根中化学成分的方法

说明书

本发明提供了一种基于UPLC‑QTOF/MS检测芦根中化学成分的方法，包括如下步骤：(1)取芦根样品制成芦根粉末，精密称定，然后与溶剂混合，称定重量，超声破碎，摇匀，进行固液分离后得到待测样品；(2)用超高效液相色谱分离步骤(1)中的待测样品，然后用质谱检测，得成分物质峰，用分析软件对所述成分物质峰进行定性分析。本发明首次采用UPLC‑QTOF/MS技术对芦根中多种化学成分进行检测并定性，该方法具有高效、快速、准确的特点。本发明共鉴定出32种化学成分，为进一步研究芦根药效物质基础及全面质量控制提供了依据。

技术领域

本发明涉及医药成分分析领域，具体涉及一种基于UPLC-QTOF/MS检测芦根中化学成分的方法。

背景技术

芦根为禾本科植物芦苇Phragmites communis Trin.新鲜或者干燥根茎，为一种常用中药，具有清热泻火、生津止渴、除烦、止呕、利尿之功效，常用于热病烦渴，肺热咳嗽，肺痈吐痰，胃热呕吐，热淋涩痛等症。目前报道从芦根中分离出多种类型化学成分，包括多糖类、黄酮类、蒽醌类、酚酸类、甾体类、生物碱、挥发性成分等(李洪,王麟,陈王莹,等.中药芦根化学成分、药理作用及临床应用研究[J].科技信息,2014,5:31-32.赵小霞,谭成玉,孟繁桐,等.芦苇化学成分及其生物活性研究进展[J].精细与专用化妆品,2013,21(1):20-22)，其中多糖类含量大，提取研究较多，药理研究表明芦根中多糖类成分具有很好的抗氧化及保肝作用(沈蔚,任晓婷,张建等.芦根多糖的提取及其抗氧化活性的研究[J].时珍国医国药,2010,21(5))。

芦根作为药典品种药材，目前研究多集中在多糖类成分，其他成分的研究尚处在初级阶段，其中的药效物质基础的研究还不够深入。由于有效成分不够明确，并且化学组分复杂，导致很难全面的评价芦根药材的内在质量。中国药典2015年版一部芦根药材项下，仅采用对照药材进行TLC鉴别。目前对于芦根药材的质量控制研究主要是以阿魏酸的高效液相含量测定和药材HPLC指纹图谱为主(如曾东等.高效液相色谱指纹图谱在中药芦根上的应用[J].分析化学,2004,32(8))。张国升等利用GC-TOF-MS技术鉴定了芦根中四种甾体的结构，其中有24-甲基胆甾醇、24-乙基胆甾醇、豆甾-1,23-二烯-3-醇、豆甾-1-烯-3-酮(张国升,李前荣,尹浩等.芦根中甾体的GC-TOFMS鉴定[J].安徽中医学院学报,2005,25(3))，但未对芦根主要含有的酚酸类及黄酮类成分进行研究。因此，对芦根的药效物质基础和质量控制开展进一步的研究显得尤为重要。

近年来，UPLC-QTOF/MS在天然产物化学成分的研究中已得到广泛应用，并且被逐渐应用于中药药效基础、药物质量控制，已经成为药理学研究中高效、可靠的分析方法(许玲玲,安睿,王新宏.液质联用技术在中药分析中的应用[J].中成药,2006,28(2):239-246)。例如陈永康等(陈永康,赵志刚,孙丽娟.液相色谱-飞行时间质谱法快速鉴定紫苏叶中的化学成分[J].医药导报,2013(3):371-374)采用了液相色谱-飞行时间质谱法快速鉴定中药紫苏叶中化学成分，为紫苏叶的开发与利用提供参考；另外，徐凤莲等人(徐凤莲,张启云,彭国梅,等.UHPLC-Q-TOF/MS分析黑顺片的化学成分[J].江西中医药,2015(2).)报道了采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)对黑顺片中各成分进行分析和鉴定，初步鉴定出黑顺片中70种化学成分，较全面地解析了黑顺片的化学成分，丰富了对黑顺片中化学物质的认识，为黑顺片药效物质研究奠定基础；李晗芸等人利用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱技术采集麻黄和其不同炮制品的复杂化学成分数据，通过对比分析，探究蜜炙、醋制、酒制、炒炭4种炮制过程中麻黄非挥发性化学成分的变化，该方法可为麻黄炮制的现代化研究提供物质基础，也可为临床区别用药提供借鉴(李晗芸,苏丹,部爱贤,等.UPLC-Q-TOF-MSE与镜像对比分析四种麻黄炮制过程的成分变化[J].质谱学报,2017,38(11):630-639)。