[发明专利]一种诱导粘膜定居性记忆T细胞形成及增殖的方法

说明书

本发明涉及粘膜免疫细胞领域，特别涉及一种诱导粘膜定居性记忆T细胞形成及增殖的方法,该方法至少包括一次肠道以外部位的初次免疫与一次肠道部位的加强免疫，从而获得大量粘膜TRM，可以用于预防和治疗病原体的粘膜入侵。其中，肠道以外部位的初次免疫方式至少包括但不限于肌肉接种、皮内接种、皮下接种、滴鼻接种、雾化吸入接种、舌下接种。肠道部位的加强免疫方式包括但不限于直肠腔内接种、通过口服肠溶型疫苗进行小肠腔内接种。

技术领域

本发明涉及粘膜免疫细胞领域，特别涉及一种诱导粘膜定居性记忆T细胞形成及增殖的方法。

背景技术

人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)是严重威胁公共卫生安全的一类病毒。联合国艾滋病规划署(UNAIDS)公布的HIV-1流行数据显示，2017年全球范围内约有3690万人感染了HIV-1，其中有180万是新发病例，主要经性接触包括生殖道和直肠粘膜途径而感染与传播，特别是男男性接触者(Man who have sex with man,MSM)感染的比例迅速增加。流行病学调查显示，男男性传播HIV的风险为1/10-1/600，远高于异性传播风险1/200-1/1000，因此，阻断包括直肠粘膜在内的性途径传播是当下HIV预防性疫苗研究的关键所在。

在过去的十年中，实施了多项HIV-1疫苗的大规模临床试验。例如2004年实施的艾滋病疫苗STEP II期临床试验，该疫苗以复制缺陷型腺病毒Ad5为疫苗载体，表达免疫原Gag-Nef-Pol，以期诱导机体产生系统T细胞应答。但由于疫苗组中具有高水平预存免疫的个体HIV的感染率反而增加，试验被提前终止。随后2009年启动的HVTN505疫苗临床试验，采用DNA疫苗初次免疫、Ad5载体疫苗(免疫原为Gag-Pol-Env)加强免疫的策略，以诱导系统T细胞应答为主，体液免疫应答为辅，仍未观察到疫苗的保护作用。2009年10月《新英格兰医学杂志》发表了在泰国实施的HIV疫苗RV144的临床试验成果。该研究始于2003年，有超过16000成年志愿者参与，使用重组金丝雀痘病毒载体疫苗ALVAC-HIV(免疫原为Gag-Pol-Env)初次免疫联合gp120蛋白(AIDSVAX B/E)加强免疫的策略，在疫苗组观察到31.2％的保护效果，保护机制主要在于诱导出中和抗体。

上述疫苗临床试验的结果，促使我们反思究竟应该诱导什么样的免疫应答才能提供有效的保护性？同时，这些保护性免疫应答的效应部位究竟应该在哪里才能有效预防病原体感染？

黏膜病毒感染机制的研究结果提示，感染早期(第一周内)病毒在黏膜局部数量少且组织适性弱，加之可供入侵的靶细胞又少，容易被黏膜组织局部的特异性免疫反应清除。新近报道的组织定居性记忆T细胞(Tissue Resident Memory T cell，TRM)相关研究显示，TRM长期定居在组织内不参与外周循环，发挥着重要的原位抗感染作用。一旦病原体入侵粘膜组织，TRM比效应记忆T细胞(Effector Memory T cell，TEM)反应更迅速，可立即识别树突状细胞呈递的抗原表位，快速分泌效应分子(细胞因子、穿孔素、颗粒酶)发挥抗感染的功能。TRM产生的细胞因子可直接通过溶细胞作用杀伤感染的细胞，它分泌的IFNγ还会触发多种天然免疫效应分子的表达。此外，TRM产生的IFN-γ、TNFα和IL-2等细胞因子还可迅速激活周围的NK细胞和树突状细胞，并通过诱导趋化因子表达而招募循环中的T细胞，B细胞和炎性单核细胞到组织局部，发挥联合抗感染作用。