[发明专利]一种合成培养基及其制备方法和用途

说明书

本发明公开了一种合成培养基及其制备和用途，其特征在于，所述合成培养基包含如下成分及其质量浓度：葡萄糖·H₂O 10～30g/L、木糖0.2～1.0g/L、硫酸铵3～10g/L、硝酸钠2～5g/L、氯化钾0.2～0.8g/L、磷酸二氢钾1.0～3.0g/L、硫酸亚铁0.02～0.08g/L、硫酸镁0.03～0.06g/L、氯化钴0.005～0.02g/L、碳酸钙2～10g/L、苯丙氨酸0.01～0.05g/L、维生素VB12 0.001～0.01g/L、维生素VB3 0.001～0.02g/L、生物素0.001～0.03g/L、甜菜碱0.01～0.1g/L，剩余余量为水。采用本发明的新型培养基培养小单胞菌，对小单胞菌发酵合成次级代谢产物的机理研究及工业化生产庆大霉素C1a具有重要意义。

技术领域

本发明属于发酵技术领域，特别涉及一种合成培养基及其制备方法和用途。

背景技术

庆大霉素C1a是国内首创、具备独立知识产权Ⅰ类的半合成新药衣替米星的母核前体。传统制备C1a的方法是采用树脂分离技术从多组分庆大霉素中提取C1a单组份，由于各组分之间结构类似，物理化学性质相近，导致了提取成本居高不下，市场上高纯度C1a售价居高不下。庆大霉素C1a作为庆大霉素多组分中的一种，工业发酵过程中采用大量的有机氮源、碳源等复合物进而导致其产物合成机理与发酵条件之间关系无法准确判定。

尽管国内外文献中针对庆大霉素合成培养进行一些报道，但是，直接用于庆大霉素C1a发酵其产物合成含量非常低。

因此，需要开发出一种适用于庆大霉素C1a的专属合成培养基提高庆大霉素C1a发酵其产物合成含量。

培养基一般包括复合培养基、半合成培养基和合成培养基。复合培养基的优点是营养成分丰富，培养效果较好，但其缺点是成分复杂，原料质量稳定性较差，造成生产产品质量稳定性也较差。目前本领域中，庆大霉素C1a生产用的都是复合培养基，虽然产量基本符合要求，但是目前本领域中尚没有应用合成培养基生产庆大霉素C1a的报道。

因此，为了研究发酵条件与产物合成代谢机理的关系，开发一种适用于庆大霉素C1a的专属合成培养基具有重要的现实意义。

发明内容

为了解决上述现有技术中庆大霉素C1a发酵其产物合成含量非常低的问题，本发明提供了一种适用于培养绛红小单胞菌或棘孢小单胞菌，使之高效生产庆大霉素C1a的合成培养基配方。本发明的培养基，适合于小单胞菌的生长，且可大大地提高庆大霉素C1a的产量。

本发明提供的一种合成培养基包含如下成分及其质量浓度：葡萄糖·H₂O 10～30g/L、木糖0.2～1.0g/L、硫酸铵3～10g/L、硝酸钠2～5g/L、氯化钾0.2～0.8g/L、磷酸二氢钾1.0～3.0g/L、硫酸亚铁0.02～0.08g/L、硫酸镁0.03～0.06g/L、氯化钴0.005～0.02g/L、碳酸钙2～10g/L、苯丙氨酸0.01～0.05g/L、维生素VB120.001～0.01g/L、维生素VB3

0.001～0.02g/L、生物素0.001～0.03g/L、甜菜碱0.01～0.1g/L，剩余余量为水。

进一步地，所述合成培养基的成分的质量浓度优选为：葡萄糖·H₂O20～28g/L、木糖0.4～0.8g/L、硫酸铵3～5g/L、硝酸钠2～3g/L、氯化钾0.4～0.6g/L、磷酸二氢钾1.5～2.5g/L、硫酸亚铁0.04～0.06g/L、硫酸镁0.04～0.05g/L、氯化钴0.01～0.015g/L、碳酸钙4～8g/L、苯丙氨酸0.03～0.05g/L、维生素VB120.005～0.008g/L、维生素VB30.005～0.008g/L、生物素0.01～0.02g/L、甜菜碱0.03～0.08g/L，剩余余量为水。