[发明专利]一株米曲霉菌株及其培养方法与制备蔗果三糖的方法

权利要求书

1.一株米曲霉菌株（Aspergillus oryzae）BLCY-009，2019年08月28日保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏号CGMCC No. 18128，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。

2.权利要求1所述的米曲霉菌株（Aspergillus oryzae）BLCY-009的培养方法，包括步骤如下：

（1）取米曲霉菌株（Aspergillus oryzae）BLCY-009接种于种子培养基中在30～35℃的条件下，增殖培养30～50h，制得种子液；

（2）取步骤（1）制得的种子液，按体积比0.2‰～1%的比例接种于发酵培养基中，在30～35℃，扩大培养20～30h，即得菌体发酵液。

3.根据权利要求2所述的米曲霉菌株（Aspergillus oryzae）BLCY-009的培养方法，其特征在于，步骤（1）中的种子培养基组分如下，均为重量百分比：

蔗糖1%；麸皮50%，余量水，pH 为5.0～6.5。

4. 根据权利要求2所述的米曲霉菌株（Aspergillus oryzae）BLCY-009的培养方法，其特征在于，步骤（2）中的发酵培养基组分如下，均为重量百分比：

蔗糖1%，麸皮1%，酵母膏1%，余量水，pH自然。

5. 根据权利要求2所述的米曲霉菌株（Aspergillus oryzae）BLCY-009的培养方法，其特征在于，步骤（2）中发酵过程在控制转速250rpm，通风比2:1，pH=4.0-5.5的环境下进行。

6.一种制备蔗果三糖的方法，包括使用权利要求1所述的米曲霉菌株（Aspergillusoryzae）BLCY-009，包括步骤如下：

（a）配制质量浓度为35-70%的蔗糖溶液；

（b）取权利要求2制备的菌体发酵液经过滤处理得到粗酶液；

（c）将得到的粗酶液加入步骤（a）配置好的蔗糖溶液中，40～60℃保温反应4～15h后得到富含蔗果三糖的粗溶液；

（d）富含蔗果三糖的粗溶液经脱色、过滤、离子交换、色谱分离、浓缩、干燥制得蔗果三糖产品。

7.根据权利要求6所述的制备蔗果三糖的方法，其特征在于，步骤（b）中，过滤采用板框式压滤机过滤，工作压力为0.3～0.5MPa，流速为5～10m³/h。

8.根据权利要求6所述的制备蔗果三糖的方法，其特征在于，步骤（c）中粗酶液的添加比例为蔗糖重量百分比的1%-5%。

9.根据权利要求6所述的制备蔗果三糖的方法，其特征在于，步骤（d）中，脱色采用活性炭脱色，活性炭添加量为1.5-2wt%，脱色时间为30-40min。

10.根据权利要求6所述的制备蔗果三糖的方法，其特征在于，步骤（d）中，色谱分离过程运行压力0.2-0.35MPa，温度60-70℃，水耗比1:1.5～1:1.8，每小时进料1.5～1.8m³。