[发明专利]具有抗肿瘤活性的山楂和山楂叶的发酵组合物及其应用

说明书

本发明公开了一种具有抗肿瘤活性的山楂和山楂叶的发酵组合物，属于微生物发酵领域。本发明挑选成熟山楂和新鲜的山楂叶，打浆、酶解、加入益生元、使用保加利亚乳杆菌、莱氏曼氏乳杆菌、裂褶菌进行微生物发酵,发酵时间10天得到山楂和山楂叶的发酵组合物。本发明首次将莱氏曼氏乳杆菌和裂褶菌应用于山楂和山楂叶的发酵制备，两者配合保加利亚乳杆菌发酵还具有显著的协同作用，能够大大增加抗食管癌细胞系(EC‑109)和人宫颈癌细胞系‑HeLa细胞增殖的作用。

技术领域

本发明涉及一种具有抗肿瘤活性的山楂和山楂叶的发酵组合物及其应用，属于微生物发酵领域。

背景技术

山楂树为落叶乔木，其叶片宽卵形或三角状卵形，长5-10厘米，宽4-7.5 厘米，两侧各有3-5羽状深裂片，裂片卵状披针形或带形，山楂树有花期，一般花期5-6月，然后在9-10月结果。中国的山楂树资源丰富，山楂树生长容易，在我国的内蒙古、河北、河南、山东、山西、陕西、江苏等地常见，多生于山坡林边或灌木丛中。山楂叶可做中药，一般泡茶饮。具有活血化瘀，理气通脉，化浊降脂的功效；山楂干制后可入药，是中国特有的药果兼用树种，其具有降血脂、血压、强心、抗心律不齐等作用，同时也是健脾开胃、消食化滞、活血化痰的良药。山楂和山楂叶含有多种对人体有益的功能成分，例如山楂酸、总黄酮、多种微量元素等有效成分。

微生物发酵是在我国具有几千年的悠久历史。《本草纲目》记载：“古人用麴，多是造酒之麴。后医乃造神麴，专以供药，力更胜之”。传统的中药生产中的中药炮制就利用了微生物进行中药发酵，以提高药效、消除副作用、改变药性等等方面。例如：六神曲、半夏曲等传统中药均由天然微生物发酵而成。微生物发酵并越来越受人们重视。

目前我国山楂加工多是传统工艺，产品附加值低。山楂叶除开入传统药外，多无其他的用处而废弃。对山楂和山楂叶的微生物发酵研究还是空白。微生物发酵本身非常复杂多变，不同的菌株，不同的发酵条件都会导致结果差别很大。

本发明为了充分利用山楂和山楂叶中的的活性物质，发挥山楂和山楂叶独特的保健作用。提供一种利用山楂叶和山楂进行微生物发酵的发酵组合物。本发明的发酵方法工艺简单，可以提高免疫功能，在细胞学实验层面观察到一定的抗肿瘤活性，具有良好的保健效果和很好的市场前景。

发明内容

本发明为了充分利用山楂和山楂叶中的的活性物质，发挥山楂和山楂叶独特的保健作用，提供一种利用山楂叶和山楂进行微生物发酵的发酵组合物。本发明的发酵方法工艺简单，可以提高免疫功能，在细胞学实验层面观察到一定的抗肿瘤活性，具有良好的保健效果和很好的市场前景。

本发明用到保加利亚乳杆菌，拉丁名称：Lactobacillus delbrueckiisubsp.Bularicus，可购自广东省微生物研究所专利菌种保藏中心，菌种编号为GIM1.155，革兰氏阳性杆菌，可用于具体用途：生产酸奶。

本发明用到裂褶菌，拉丁名称：Schizophyllum commune Fr，可购自广东省微生物研究所专利菌种保藏中心，菌种编号为GIM5.44，真菌，可用于具体用途：产L-苹果酸。

本发明用到莱氏曼氏乳杆菌，拉丁名称：Lactobacillus leichmannii，可购自广东省微生物研究所专利菌种保藏中心，菌种编号为GIM1.823，革兰氏阳性杆菌，可用于具体用途：用于维生素B12钴胺素。

本发明首次将保加利亚乳杆菌、裂褶菌、莱氏曼氏乳杆菌应用于山楂和山楂叶的发酵产物制备。本发明发现，使用普通的保加利亚乳杆菌对山楂和山楂叶的发酵并没有相应的抗食管癌细胞系(EC-109)和人宫颈癌细胞系-HeLa细胞增殖的作用，裂褶菌是一种常见的真菌，其本身有一定的抗肿瘤的作用，本次试验发现单添加裂褶菌能够对HeLa细胞有一定抑制作用，但是对食管癌细胞系(EC-109)抑制作用弱。而单添加莱氏曼氏乳杆菌对食管癌细胞系(EC-109) 和HeLa细胞抑制作用均弱。但是同时添加莱氏曼氏乳杆菌和裂褶菌能够大大增加抗食管癌细胞系(EC-109)和抗人宫颈癌细胞系-HeLa细胞增殖的作用。