[发明专利]一种寨卡病毒NS1抗原及其在制备荧光免疫层析试剂中的应用

说明书

本发明涉及一种寨卡病毒NS1抗原及其在制备荧光免疫层析试剂中的应用，寨卡病毒NS1抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。制备的荧光免疫层析试剂为检测寨卡病毒抗体的荧光免疫层析试剂，其包括由样品垫、标记物垫、包被垫、吸收垫依次搭接并贴在底衬卡，所述标记物垫为包被有荧光乳胶微球标记鼠抗人IgG单克隆抗体的玻璃纤维，所述包被垫为包被有羊抗兔鼠IgG的抗体作为质控线和包被有寨卡病毒NS1抗原的检测线的硝酸纤维素膜。本发明提供的寨卡病毒NS1抗原，具有较好的表达效果，用于制备的检测寨卡病毒IgG抗体的荧光免疫层析试剂，可用紫外线照射后，肉眼观察检测结果。

技术领域

本发明涉及一种检测寨卡病毒NS1抗原及其在制备荧光免疫层析试剂中的应用，属于医学免疫学中荧光免疫层析技术领域。

背景技术

人感染寨卡病毒(Zika Virus)后，会有1/4-1/5的感染者会发病，其临床特征轻微多为流感样表现，主要为发热、关节痛、皮疹或结膜炎，持续数天到一周会痊愈，但也有部分患者会出现格林-巴利综合征，对孕妇威胁极大，导致胎儿流产、新生儿小头畸形甚至死亡。寨卡病毒病亟需要预防和防控。

寨卡病毒感染后，其症状轻微，约有80％的寨卡病毒感染者不会出现任何症状，这给临床诊断及寨卡病毒的防控造成很大干扰。寨卡病毒感染的实验室诊断方法包括血清或血浆分离病毒、检测病毒核酸或病毒特异性IgM抗体及中和抗体。血清或血浆分离病毒耗时耗力，检测时间长，检测病毒核酸主要是检测病毒RNA，目前的研究表明，寨卡病毒的潜伏期为3-12天，而在感染症状出现的前两天出现后11天内均可在感染者血清中检测出病毒，但采用核酸检测易污染，检测结果不准确。而传统的血清学检测方法是寨卡病毒检测的主要方法，在感染症状出现约3天后，在血清中可检测出寨卡病毒特异性抗体，目前大多采用的是酶联免疫吸附测定方法来检测寨卡病毒抗体。但酶联免疫吸附测定方法需要专门的检测仪器，检测时间长，且检测灵敏度不高，检测所用的抗原有特异性不强，用于免疫学检测时，有假阳性检测结果的弊端。目前的寨卡病毒抗原制备的方法，其表达量不高，主要是由于寨卡病毒抗原的氨基酸翻译的密码子不适用。

发明内容

(一)要解决的技术问题

为了解决现有技术的上述问题，本发明提供一种寨卡病毒NS1抗原及其在制备荧光免疫层析试剂中的应用，利用寨卡病毒NS1抗原制备的检测试剂具有较强的特异性，有效避免假阳性。

(二)技术方案

为了达到上述目的，本发明采用的主要技术方案包括：

一种寨卡病毒NS1抗原，所述寨卡病毒NS1抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

如上所述的寨卡病毒NS1抗原，优选地，编码所述寨卡病毒NS1抗原的基因序列如SEQ ID NO.2所示。

如上所述的寨卡病毒NS1抗原在制备荧光免疫层析试剂中的应用。

进一步地，所述荧光免疫层析试剂为检测寨卡病毒抗体的荧光免疫层析试剂，其包括由样品垫、标记物垫、包被垫、吸收垫依次搭接并贴在底衬卡，所述标记物垫为包被有荧光乳胶微球标记鼠抗人IgG单克隆抗体的玻璃纤维，所述包被垫为包被有羊抗鼠IgG的抗体作为质控线和包被有寨卡病毒NS1抗原的检测线的硝酸纤维素膜。

如上所述的应用，优选地，所述检测寨卡病毒抗体的荧光免疫层析试剂由如下方法制备：

S1、利用寨卡病毒NS1蛋白的基因序列如SEQ ID NO.2所示，制备寨卡病毒抗原；

S2、标记物垫的制备：将荧光乳胶微球标记鼠抗人IgG单克隆抗体，包被在玻璃纤维上，37℃干燥；

S3、硝酸纤维素膜上设有质控线和检测线，质控线上包被有羊抗鼠IgG的抗体，检测线上包被有寨卡病毒NS1蛋白，获得包被垫；