[发明专利]一种含脐带间充质干细胞外泌体的修复抗衰护肤品

权利要求书

1.一种含脐带间充质干细胞外泌体的修复抗衰护肤品，其特征在于，包括以下成分：间充质干细胞外泌体、甘露醇、EDTA-2Na、黄原胶、丁二醇、甘油、水溶性霍霍巴油、橄榄油、聚二甲基硅氧烷、羟乙基纤维素、氢化卵磷脂、枯草杆菌脂肽钠、PCA Na、尿素、透明质酸、β-葡聚糖、干细胞分泌素、血清白蛋白、神经酰胺-2和水。

2.如权利要求1所述的脐带间充质干细胞外泌体的修复抗衰护肤品，其特征在于，由以下重量百分数的组分组成：间充质干细胞外泌体0.1％～1％，甘露醇5％～7％，EDTA-2Na0.05％～0.25％，黄原胶0.10％～0.25％，丁二醇3％～5％，甘油1％～3％，水溶性霍霍巴油0.3％～0.6％，橄榄油2％～10％，聚二甲基硅氧烷1.5％～2.5％，羟乙基纤维素0.4～0.6％，氢化卵磷脂1.0％～2.0％，枯草杆菌脂肽钠0.4％～0.8％，PCA Na 0.4～0.6％，尿素0.2～0.5％，透明质酸0.4～0.6％，β-葡聚糖0.2～0.5％，干细胞分泌素2～5％，血清白蛋白0.05～0.15％，神经酰胺-2 0.05～0.15％，余量为水。

3.如权利要求1或2所述的脐带间充质干细胞外泌体的修复抗衰护肤品，其特征在于，还包括以下成分：霍霍巴油、角鲨烷、乳木果油、辛酸葵酸甘油三酯、甘草酸二钾、视黄醇棕榈酸酯、积雪草提取物和维生素E醋酸酯。

4.如权利要求3所述的脐带间充质干细胞外泌体的修复抗衰护肤品，其特征在于，由以下重量百分数的组分组成：间充质干细胞外泌体0.1％～1％，甘露醇5％～7％，EDTA-2Na0.05％～0.25％，黄原胶0.10％～0.25％，丁二醇3％～5％，甘油1％～3％，水溶性霍霍巴油0.3％～0.6％，橄榄油2％～10％，聚二甲基硅氧烷1.5％～2.5％，羟乙基纤维素0.4～0.6％，氢化卵磷脂1.0％～2.0％，枯草杆菌脂肽钠0.4％～0.8％，PCA Na 0.4～0.6％，尿素0.2～0.5％，透明质酸0.4～0.6％，β-葡聚糖0.2～0.5％，干细胞分泌素2～5％，血清白蛋白0.05～0.15％，神经酰胺-2 0.05～0.15％，霍霍巴油1.5％～2.5％，角鲨烷0.3％～0.6％，乳木果油0.8％～1.2％，辛酸葵酸甘油三酯1.5％～2.5％，甘草酸二钾0.08％～0.12％，视黄醇棕榈酸酯0.02％～0.03％，积雪草提取物0.4％～0.6％，维生素E醋酸酯0.4％～0.6％，余量为水。

5.如权利要求1-4任一所述的脐带间充质干细胞外泌体的修复抗衰护肤品，其特征在于，所述的间充质干细胞外泌体，为人的脐带间充质干细胞分泌的多种活性因子的混合物。

6.如权利要求1-5任一所述的脐带间充质干细胞外泌体的修复抗衰护肤品，其特征在于，所述的间充质干细胞外泌体的制备方法，包括以下步骤：

A、取胎盘，分离出绒毛膜，用PBS缓冲液冲洗去除红细胞，将绒毛膜剪成10～20mm³大小的组织块，加入胶原酶消化液进行消化；

B、取消化后的组织块，过滤得滤液1，剩余组织加入用胰蛋白酶进行，消化后，组织悬块过滤得滤液2；合并滤液1和滤液2，加入血清终止消化，离心，弃去上清，收集离心获得的细胞；

C、将细胞以2×10⁶/cm²的密度接种至含10％FBS的DMEM培养基中，37℃、5％CO₂、饱和湿度下培养，每隔一段时间换液一次并去除未贴壁细胞；待细胞融合率达到80％～90％时，消化细胞进行传代培养；等扩增到所需数量时，离心去除细胞以及碎片等，收集上清，过0.22μm无菌滤膜，加入终浓度为10％的聚乙二醇，混匀，4℃孵育8～14小时，离心，弃去上清，用PBS缓冲液重悬沉淀，加入终浓度为8％的聚乙二醇，再次孵育1小时，离心，PBS缓冲液重悬沉淀，即得间充质干细胞外泌体，分装，-80℃保存。

7.如权利要求6所述的脐带间充质干细胞外泌体的修复抗衰护肤品，其特征在于，所述的步骤B中，过100目滤网。