[发明专利]在重组宿主中生产甜菊醇糖苷的方法

说明书

本发明公开了一种在重组宿主中生产甜菊醇糖苷的方法，包括以下步骤：选材、提取、分离、纯化和混合五到工序进行在重组宿主中生产甜菊醇糖苷，使得甜菊醇糖苷安全性高，经国内外药理实验证明，甜菊糖甙为非致癌性物质，无毒无副作用，食用安全。甜叶菊原产地南美巴拉圭、巴西等地的居民食用甜叶菊已有四百多年历史，至今未发现有任何毒害，低热值，可应用于低热量食品、饮料和医药。长期食用甜菊糖甙不会使人发胖，且有降血糖、防龋齿、健胃、解除疲劳之功能，并对健美减肥和糖尿病、心脏病、高血压、动脉硬化等患者食用有辅助疗效，是制作保健食品、保健饮料、保健化妆品和医药制品等最佳天然甜味剂。

技术领域

本发明涉及甜菊醇糖苷技术领域，具体为一种在重组宿主中生产甜菊醇糖苷的方法。

背景技术

甜味剂作为最常用于食品、饮料或糖果业的成分是公知的，甜味剂既可以在生产过程中加入最终食品，也可以在适当稀释的情况下作为佐餐甜味剂或者作为烘培中糖的家用替代品来单独使用，甜味剂包括天然甜味剂(例如蔗糖、高果糖玉米糖浆、糖蜜、枫糖浆和蜂蜜)和人工甜味剂(例如阿斯巴甜、糖精和蔗糖素)。甜菊提取物是可以从常青灌木甜叶菊中分离和提取的一种天然甜味剂。甜菊在南美和亚洲被广泛种植用于商业生产甜菊提取物。纯化程度各不相同的甜菊提取物在商业中用作食品中的高甜度甜味剂，以及共混或单独地作为佐餐甜味剂,甜菊植物的提取物含有莱鲍迪苷和其他带来甜味的甜菊醇糖苷类，但不同产品批 次之间每种糖苷的量往往不同。现有的商品中占优势的是莱鲍迪苷A，和量少一些的其他糖苷，例如莱鲍迪苷C、D和F。甜菊提取物还可能含有杂质，例如造成异味的来源于植物的化合物。这些异味根据食物系统或应用选择可能会带来或多或少的问题，从而影响甜菊醇糖苷重组宿主中生产的速率，从而影响甜菊醇糖苷的甜度。

发明内容

（一）解决的技术问题

针对现有技术的不足，本发明提供了一种在重组宿主中生产甜菊醇糖苷的方法，具备甜度高等优点。

（二）技术方案

为实现上述甜度高的目的，本发明提供如下技术方案：一种在重组宿主中生产甜菊醇糖苷的方法，包括以下步骤：

S1、选材

筛选新鲜的菊科草本植物甜菊叶，将新鲜的菊科草本植物甜菊叶进行清洗，清洗后的菊科草本植物甜菊叶放置在烘干机中进行烘干或者晒干，得到菊科草本植物甜菊叶干，然后利用研磨机将得到的菊科草本植物甜菊叶干,研磨成粉末，最后利用筛子过筛，得到菊叶干粉末。

S2、提取

确定最佳提取方法是加酶浸提法，加酶法的最佳工艺条件是：采用纤维素酶，最佳浸提温度是45℃，最佳pH=5，酶用量为0.3%，浸提时间为100-120min。

S3、分离

往料液中加入絮凝剂，达到除杂的目的，确定采用新型高效复合PAMCaOFeCl3++有机高分子絮凝剂，最佳絮凝条件:最佳复合絮凝剂配比PAM:CaO:FeCl3=1：2.5：0.05，最佳絮凝pH=9，在70℃-90℃水浴中静置10-30min。

S4、纯化

采用树脂进行吸附脱色精制，采用CL型离子交换纤维脱色，采用大孔吸附树脂吸附后，用酸碱洗涤，用70%-90%的乙醇洗脱，大孔树脂吸附的动态吸附在pH为8-10，吸附流速为2BV/h时，甜叶菊糖苷的吸附量最大，同时，以70%乙醇为洗脱剂，流速为1BV/h，用2BV就可以完全解吸。其酸洗涤精制的最佳工艺条件为：酸(HCl)浓度为5%，洗涤流量为 1BV/h，酸用量2BV，其碱洗涤精制的最佳工艺条件为：碱(NaOH)浓度为 3%，流量为 1BV/h，碱液量 2BV。

S5、混合

利用重组宿主对生产甜菊醇糖苷进行重组微生物和方法。