[发明专利]小球藻内生菌的编码基因及其扩增用特异性引物

说明书

本发明涉及一种球藻培养用菌种，特别涉及一种小球藻内生菌的编码基因及其扩增用特异性引物，属于生物技术领域。一种编码所述小球藻内生菌的基因，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。该小球藻内生菌是细杆菌属细菌（Microbacteriumsaccharophilum）的菌株S395‑2，该菌株于2018年7月30日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，编号为CGMCC No.16182。所述的小球藻内生菌在促进小球藻生长方面的应用。小球藻内生菌S395‑2能够作为促进微藻生长和改善微藻生长品质的新微生物资源。

技术领域

本发明涉及一种球藻培养用菌种，特别涉及一种小球藻内生菌的编码基因及其扩增 用特异性引物，属于生物技术领域。

背景技术

植物内生菌是一种新型的，可持续发展的微生物资源，具有广泛的应用前景。距kloepper第一次提出“植物内生菌”的概念到目前为止，国内外关于植物内生菌的研究已有一百多年的历史，但由于其未表现出明显的外在特征和相应作用，导致该微生物类群 长期被人们所忽视。直至二十世纪末，Stierle等在短叶红豆杉组织内部分离筛选得到一 株可产紫杉醇的植物内生真菌，该项研究才得以重视和深入开展，并进而成为国内外研 究热点。研究者根据不同的研究目的从各个角度探索植物内生菌的意义，极大地促进了 植物内生菌多样性的研究，丰富了其内涵，为后续研究提供了宝贵的参考意见。

小球藻中含有丰富的蛋白质、食物纤维、叶绿素等营养素，可以促进和维持人体健康，目前已作为保健品出现在市场上。同时现如今微藻已经被研究者公认为是优质的生 物柴油原料之一，藻类的产油速率也要明显高于目前市场上常用的油料作物。因此微藻 作为第三代生物燃料原料的开发利用也日益增长。小球藻最早被利用的性质是其高含量 的蛋白，蛋白质含量可达64.60％，可广泛应用于疾病辅助治疗、食品添加剂、保健美 容等领域。因而提高小球藻生长指标是开发应用小球藻的关键。

已有研究表明，许多微生物都能存活于植物组织内，并与植物建立良好的共生关系， 且大多数都能促进植物的生长。植物内生菌可通过产生植物生长激素类物质来发挥其促 生作用，这些植物生长调节激素主要包括植物生长素、赤霉素、玉米素以及细胞激动素等，能直接促进植物的生长。蔡学清等研究发现内生菌BS-2对辣椒苗具有明显的促生 作用，经该菌株处理后，宿主植物体的植物生长调节激素如IAA、GA3等含量增加， 从而促进辣椒苗的生长，提高辣椒的产量。易有金等利用内生枯草芽孢杆菌B-001对烟 草幼苗进行温室盆栽试验，在内源激素检测过程中发现烟草中赤霉素、玉米素核苷和吲 哚乙酸的含量增加，促进了烟草幼苗的生长。研究发现，采用细菌与微藻共培养不仅可 以使藻细胞生长量提高30％-300％，还能显著增加小球藻的生长指标，比如提高藻粉含 量，提高藻细胞叶绿素a,b和类胡萝卜素等色素含量，增加产油量，大幅降低传统培养 的成本。在此背景下，寻找新的微生物资源用于改良菌藻共培养技术具有巨大前景。植 物体是一个复杂的微生态系统，健康植物体内含有大量的内生菌，这些植物内生菌是能 够定殖在植物体内，与宿主植物建立和谐共生关系的一类微生物，它们可以促进寄主植 物的生长，使植物保持良好的生长状态，提高植物自身的抗病能力。探索内生菌对其原 始宿主小球藻的促生作用，对小球藻规模化生产意义重大。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一种小球藻内生菌的编码基因。

本发明的另一个目的是提供上述小球藻内生菌的扩增用特异性引物。

本发明的上述技术问题是通过以下技术方案得以实施的：

一种编码所述小球藻内生菌的基因，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。该小球藻内生菌是细杆菌属细菌(Microbacterium saccharophilum)的菌株S395-2，该菌株于2018年7月30日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，编号为CGMCC No.16182，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。所述的小球藻内生菌在促进小 球藻生长方面的应用。