[发明专利]一种对多种牛的疫病进行联检的基因芯片以及试剂盒

说明书

本发明涉及一种核酸序列，以及用于对牛的疫病进行检测的基因芯片，其包括反应孔板，其中在每个反应孔中点样针对多种牛的疫病的核酸序列、阳性对照、阴性对照和空白对照；本发明另外涉及包括该基因芯片的检测试剂盒。

技术领域

本发明涉及生物检定领域，特别是用于检测牛的血清或者其他组织中是否含有(七种疫病当中的)一种或几种病原体的基因芯片检测试剂盒，其可用于流行病学调查以及动物疾病的辅助诊断检测。

背景技术

牛布鲁氏菌病、结核、炭疽、口蹄疫、病毒性腹泻黏膜病、副流感、传染性鼻气管炎这几种牛的疫病非常容易发病，严重威胁着我国畜牧产业的发展。建立一种快速高效检测这几种牛的疫病的方法用以这些疾病的预防和防控十分必要。牛布鲁氏菌、结核、炭疽、FMDV、BVDV、BPIV3、IBRV均易感牛，都可以通过呼吸道和消化道感染。在不同程度上均可造成牛消瘦、母牛流产，甚至导致死亡。目前，我国针对这几种病的检测主要以病原分离、血清学试验和分子生物学检测方法为主。血清学方法包括中和试验和Elisa。这些方法均可有效的检测这几种病，但是无法同时检测几种病原的混合感染。

在生物检定领域经常使用的基因芯片中起本质作用的是其中的基因探针序列，通过点样仪，可以把基因探针序列固定在反应孔中固相基质的特定位置以形成微阵列。进行检测时，需先对样品进行处理：在对样品提取核酸后，对核酸进行扩增，然后与基因芯片共同孵育，使得特异性的扩增产物与基因芯片上的固定基因探针相结合。之后清洗去除未结合的扩增产物，加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(SA-HRP)，其与特异结合在基因探针上的扩增产物形成复合物。最后清洗掉未结合的SA-HRP，加入化学显色底物TMB，产生肉眼可见的蓝紫色信号，进行扫描拍照。

现有技术中存在的问题为，上述牛的疫病经常合并发生，在此情况下，通常需要使用多种基因芯片检测试剂盒，效率低下且耗费人工，容易发生系统误差。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了：

1.一种核酸序列组合，其包括：

用于检测牛布鲁氏菌病的

SEQ ID NO1:CTGAACCCGGTTATGCCGTACCTCAC

用于检测炭疽16SRDNA的

SEQ ID NO2:ATCCCGAGCAAATGATCCCT

用于检测炭疽POX1质粒的

SEQ ID NO3:TCCAGCACTTGTACTTCGCTT

用于检测口蹄疫的

SEQ ID NO4:ACGCCGTGGGACCATACAGGA

用于检测传染性牛鼻气管炎的

SEQ ID NO5:CTCGCGGAGCTGGAGGTGATCAG

用于检测牛病毒性腹泻黏膜病的

SEQ ID NO6:CATGCCCAAAGCACATCTTAACCT

用于检测牛副流感的

SEQ ID NO7:TTTAGGACATTCGCCACAC。

2.根据项1所述的核酸序列组合，其还包括：

用于检测牛结核的

SEQ ID NO8:CATCAGCCTGGCCGCACGAGTTA。

3.一种基因芯片，其包括：

反应孔板，以及

固定在所述反应孔板的各反应孔中的、根据项1或2所述的核酸序列组合。