[发明专利]一种猪伪狂犬病毒gE/gB抗体快速检测装置

说明书

本发明公开了一种猪伪狂犬病毒gE/gB抗体快速检测装置，属于生物检测技术领域。本发明猪伪狂犬病毒gE/gB抗体快速检测装置，包括反应装置和样品处理液两部分；本发明猪伪狂犬病毒gE/gB抗体快速检测装置可用于猪伪狂犬病毒感染及疫苗免疫的鉴别诊断和评估疫苗免疫效果，检测灵敏度高、特异性强，重复性和稳定性佳，使用快捷方便，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种猪伪狂犬病毒gE/gB抗体快速检测装置。

背景技术

伪狂犬病毒(Pseudorabies，PR)是由伪狂犬病毒(Pseudorabies Virus，PRV)感染引起的多种家畜和野生动物共患的一种急性传染病。猪是伪狂犬病最主要贮存宿主和传染源，该病在猪呈爆发性流行，可引起妊娠母猪流产、死胎，公猪不育，新生仔猪腹泻、神经症状、大量死亡，育肥猪呼吸困难、生长停滞等，是危害全球养猪业的重大传染病之一。英国、丹麦、荷兰、比利时及美国等欧美国家相继实现PRV净化。中国自2011年以来PRVgE阳性率逐年增高，防控力度越来越大。我国已启动PRV净化计划，要求2020年国家核心育种场必须PRV净化。

在PRV与宿主的相互作用中，结构蛋白gB非常保守，具有良好的免疫原性且抗原表位非常清晰可作为理想的血清学检测用抗原。gE蛋白是PRV的一种非常重要的糖蛋白，在决定PRV毒力及神经嗜性等方面起着重要作用，但是gE不是PRV增值所必需的蛋白，常作为缺失的候选基因。检测PRV抗体时要同时监测gE、gB两种抗体，PRV gE抗体检测能有效的区分野毒感染，结合gB抗体检测，能在区分野毒感染的同时监测疫苗抗体水平。因为野毒感染时gB、gE同时阳性，如果没有感染野毒，免疫gE基因缺失疫苗后，gE阴性，gB阳性。若只检测gB抗体，检测结果gB抗体水平很高有可能是野毒感染所致；若只检测gE呈阳性说明野毒感染，为了保护易感猪群还需检测gB抗体水平确定免疫方案。

PRV鉴别诊断方法包括PCR、ELISA、IPMA、胶体金等，PCR和IPMA由于操作复杂，需要专业知识和特殊设备，所以难以广泛推广和现地检测。目前，单克隆抗体已成为研究各种疾病的良好工具。单克隆抗体由于具有特异性强、均质性高、易于标准化以及可批量生产等优点，已被广泛应用于免疫学、肿瘤学、遗传学和其他学科中各种复杂现象的研究中，也广泛应用于诊断、治疗、生物材料的纯化等技术实践中，并以诊断应用居多。胶体金免疫层析技术具有快速简便优点，但也存在灵敏度低、准确性重复性较差、难以进行定量等缺点。本发明克服了胶体金和ELISA技术的不足，保留了胶体金的快速简便优势和ELISA高灵敏高特异优点，使其在现地有了很好的应用。

发明内容

针对现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种猪伪狂犬病毒gE/gB抗体快速检测装置，该装置可用于猪伪狂犬病毒感染及疫苗免疫的鉴别诊断和评估疫苗免疫效果，检测灵敏度高、特异性强，重复性和稳定性佳，使用快捷方便，具有良好的应用前景。

为了达到上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种猪伪狂犬病毒gE/gB抗体快速检测装置，包括反应装置和样品处理液两部分；所述反应装置为顶部敞口的盒体，盒体的敞口上扣装有扣罩，扣罩内安装反应条且扣罩倾斜设置，扣罩的低端通过弹片连接在盒体上、扣罩的高端设置按压键，扣罩上在靠近按压键的位置上开设加样孔；所述反应条包括PVC底衬板、硝酸纤维素膜、吸水滤纸和样品处理垫，硝酸纤维素膜、吸水滤纸和样品处理垫均粘贴在PVC底衬板上且硝酸纤维素膜位于中部，样品处理垫和吸水滤纸分别搭接在硝酸纤维素膜的高端和低端；硝酸纤维素膜的中部间隔设置一个包被有猪伪狂犬gE重组蛋白的检测点1、一个包被有猪伪狂犬gB重组蛋白的检测点2和一个包被有鼠抗羊IgG二抗的质控点，检测点1、检测点2和质控点呈三角排列，在靠近吸水滤纸的位置处设置包被有亚甲基蓝的反应指示线，扣罩上开设有正对硝酸纤维素膜的观察窗；盒体的内部设置有试剂槽，试剂槽位于PVC底衬板贴有样品处理垫一端的正下方，试剂槽的开口上封装有密封薄膜，PVC底衬板的底面上连接有可在按压键按下时将密封薄膜刺破的钩刺。