[发明专利]一类抗人EGFR抗体药物偶联物及其制备方法与应用

权利要求书

1.一类抗人EGFR抗体药物偶联物，其特征在于，所述的抗人EGFR抗体药物偶联物具有式I所示结构：

其中，

所述的抗体为SCT-200单克隆抗体，z＝2～8；

M为能与抗体半胱氨酸巯基反应的间隔区部分，其结构为以下所示结构中的一种:

其中，n＝0,1,2,3,4或5，m＝1～10,12或24；

C为能够在酶的作用下发生水解的部分，选自二肽序列Val-Cit,Val-Ala,Val-Lys或Val-Arg；或三肽序列Ala-Val-Ala,Gly-Phe-Gly,Gly-Phe-Lys或Ala-Phe-Lys；或四肽序列Gly-Gly-Phe-Gly或Gly-Phe-Leu-Gly中的一种；

R为自分解部分，其结构为以下所示结构中的一种:

2.一种制备权利要求1所述的抗人EGFR抗体偶联药物的方法，其特征在于，包括：将具有式II结构的Linker-MMAE与SCT-200单克隆抗体的链间二硫键发生加成反应制得所述的抗人EGFR抗体药物偶联物；

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将Linker-MMAE溶于二甲基亚砜，得到连接子-细胞毒药物储备液；

(2)将还原剂溶于缓冲液中，配置还原剂储备液；

(3)将L-Cys溶于缓冲液中，制备L-Cys储备液；

(4)将SCT-200单克隆抗体加入步骤(2)所述的还原剂储备液中，孵育1-2h；

(5)向步骤(4)得到的反应液中加入步骤(1)的连接子-细胞毒药物储备液，孵育1-2h，制备抗人EGFR抗体药物偶联物；

(6)向步骤(5)得到的反应液中加入步骤(3)的L-Cys储备液，停止反应。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中还原剂为TCEP，混合时以SCT-200单克隆抗体的摩尔量为基准，还原剂的摩尔量为抗体摩尔量的2-4倍。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(5)中混合时以SCT-200单克隆抗体的摩尔量为基准，所加Linker-MMAE连接子-细胞毒药物的摩尔量为抗体摩尔量的4-8倍。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，在所述步骤(4)和步骤(5)中的反应在氮气保护下进行，步骤(4)中的反应温度为35～40℃。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(4)中的反应温度为37℃。

8.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，还包括将得到的抗体药物偶联物进一步纯化的步骤。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，采用AKTA purifier蛋白质纯化系统，收集所需抗体偶联药物组分峰；收集完毕后，使用30kDa超滤管进行超滤离心，浓缩，经无菌滤膜过滤，低温储存。

10.权利要求1所述的抗体药物偶联物在制备用于肿瘤靶向治疗的药物中的用途，其中，所述的肿瘤为EGFR阳性实体肿瘤，包括鳞状上皮细胞癌，食管癌，鼻咽癌，肺癌，乳腺癌，胰腺癌，前列腺癌，头颈癌，结肠癌。

11.以权利要求1所述的抗体药物偶联物为活性成分的用于肿瘤靶向治疗的药物组合物，其特征在于，含有药学上有效量的权利要求1所述的抗体药物偶联物及药学上允许的佐剂。