[发明专利]一种抗枯萎病苦瓜强雌系的选育方法

权利要求书

1.一种抗枯萎病苦瓜强雌系的选育方法，其特征是步骤如下：

（1）应用对羟基苯甲酸苗期接种鉴定技术，对苦瓜自交系材料进行枯萎病抗性鉴定，筛选出高抗枯萎病自交系材料；

（2）以强雌系材料为母本，高抗枯萎病自交系材料为父本进行杂交，F₁代自交；

（3）种植F₂代，在全生育期内对各单株的雌、雄花发生数量、着生部位进行观察，并分别人工自交授粉；筛选出强雌性单株，分单株留种；

（4）次年将强雌性单株种子播于苦瓜枯萎病病圃，以单株雄花数少、果实商品性好、田间表现抗枯萎病力强为目标性状进行株选，得到抗枯萎病力强的强雌性株F₃；

（5）此后，对该抗枯萎病强雌性株F₃继续在病圃进行4代自交分离，定向选择，经田间淘汰不抗病株系，获得遗传性状稳定、田间表现抗枯萎病力强的抗枯萎病苦瓜强雌系。

2.根据权利要求1所述的抗枯萎病苦瓜强雌系的选育方法，其特征是，步骤（3）、（4）中，选用全生育期单株雄花不超过5朵，果身粗细均匀的植株。

3.根据权利要求1所述的抗枯萎病苦瓜强雌系的选育方法，其特征是，步骤（4）、（5）中，目标性状经双重选择获得，即病圃选择和人工定向选择。

4.根据权利要求1所述的抗枯萎病苦瓜强雌系的选育方法，其特征是，对羟基苯甲酸苗期接种鉴定技术如下：

对羟基苯甲酸溶液与尖孢镰刀菌孢子悬浮液的制备：配置浓度为0.3mmol·L^-1的对羟苯甲酸溶液备用，将已活化的尖孢镰刀菌苦瓜专化型菌饼接种于PS液体培养基，6天后用4层无菌纱布过滤，得枯萎病菌孢子悬浮液，离心后用无菌水将枯萎病菌孢子悬浮液浓度调至1×10⁶ cfu·mL^-1备用；

待苦瓜幼苗长至三叶一心时拔出，洗净根部基质，在枯萎病菌孢子悬浮液中浸泡30min，然后重新栽入无菌基质种，施入对羟基苯甲酸溶液80 mL，置于人工气候箱，接种后12天调查苦瓜发病情况，判断发病植株病情级数。

5.根据权利要求1所述的抗枯萎病苦瓜强雌系的选育方法，其特征是，判断发病植株病情级数的依据为：将植株病情分为5级；病情0级：无症状；I级：1~2片子叶明显变黄；II级：子叶发黄并萎蔫，维管束轻度变色；III级：子叶枯死，真叶发黄，维管束褐色；IV级：全株萎蔫或枯死，维管束褐色；0和I级为抗病植株，II~IV级为感病植株，根据病情指数DI进行品种抗病性分级，品种抗病性分为5级，病情指数0~15为高抗HR，15~30为抗病R，30~50为中抗MR，50~70为感病S，70~100为高感HS；病情指数=Σ(病株数×该级代表值)/(总株数×最高级代表)×100；其中，该级代表值为发病植株病情级数，最高级代表为4级。