[发明专利]一种长效抗菌促愈合角蛋白敷料的制备方法

说明书

本发明公开了一种长效抗菌促愈合角蛋白敷料的制备方法，包括(1)将一定量再生人发角蛋白完全溶解于98v/v％甲酸溶液，搅拌均匀，角蛋白溶液；(2)采用冷冻干燥，得到角蛋白冻干海绵；(3)将角蛋白冻干海绵经等离子处理器处理活化；(4)将活化处理的角蛋白冻干海绵浸泡在重组人表皮生长因子hEGF、二硫苏糖醇和N,N‑二(癸基丙胺基)‑巯基甘氨酸的溶液中进行负压闪爆，之后进行接枝反应；(5)将完成接枝反应的角蛋白海绵离心冻干。本发明制备的角蛋白海绵是一种能够诱导皮肤组织损伤部的再生的医疗用材料，能够抑制伤口微生物的生长，刺激皮肤成纤维细胞的增殖，促进伤口愈合。

技术领域

本发明涉及生物医学工程领域，具体涉及一种长效抗菌促愈合角蛋白敷料的制备方法。

背景技术

在临床上，由于伤口表面是一个温暖而潮湿的环境，金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌等病原体在伤口上快速繁殖，造成伤口易感染且不易愈合。为了遏制微生物繁殖，控制伤口感染，大量医用敷料被广泛应用于伤口覆盖保护，并在医用敷料使用的同时考虑加入抗生素或其他抗菌剂，以协助控制止血、保护伤口、减少感染、吸收分泌物、保持体温和促进伤口愈合。

在新型抗菌剂中，载银抗菌敷料因其优良的抗菌性和无耐药性，在医用敷料中的应用已被广泛重视，如应用于烧烫伤外科、创伤外科、多种疾病引起的皮肤溃疡，特别是用于久治不愈的褥疮或其他慢性感染创面。但是纳米银对人体和环境存在一定的危险性。有研究报道纳米银对动物生殖系统有较大影响。因此，需要一种新型的医用敷料，能够持久抗菌，且具有生物相容性和生态相容性。

角蛋白具有可生物降解、生物活性高和相容性好的优势，从人发中提取的角蛋白还具有低免疫排异性。相对于其他本体材料，角蛋白来源几乎不受限制，因而在化妆品领域的研究应用受到越来越多的重视。近年来，人发角蛋白以凝胶、海绵支架、涂层、膜以及复合材料的形式应用于神经材料、皮肤敷料、细胞培养、药物载体以及软组织修复等方面，显示出其在再生医学领域的发展潜力。角蛋白是各种类型上皮细胞的主要结构蛋白，对伤口愈合有重要作用。因此，将再生人发角蛋白用于面膜的基质能够大大减弱其致敏性，生物相容性更佳。但是由于角蛋白的疏水、耐酸、耐碱特性，对其进行化学加工不易，因此分子间作用力较弱，角蛋白材料较松散，机械强度不高、弹性差。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种长效抗菌促愈合角蛋白敷料的制备方法，本发明提供的方法制备得到的角蛋白敷料能够抑制微生物生长，修复皮肤细胞。

为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：

一种长效抗菌促愈合角蛋白敷料的制备方法，包括如下步骤：

S1：将再生人发角蛋白完全溶解于98v/v％甲酸溶液，搅拌均匀，得到角蛋白溶液；

S2：将所述角蛋白溶液冷冻干燥，得到角蛋白冻干海绵；

S3：将所述角蛋白冻干海绵经等离子处理器处理活化，得活化角蛋白冻干海绵；

S4：将所述活化角蛋白冻干海绵浸泡在含有重组人表皮生长因子、二硫苏糖醇和N,N-二(癸基丙胺基)-巯基甘氨酸的混合溶液中进行负压闪爆，之后进行接枝反应，离心冻干得长效抗菌促愈合角蛋白敷料。

优选的，步骤S1中，所述角蛋白溶液中再生人发角蛋白的浓度为10～30g/L。

优选的，步骤S2中，冷冻干燥的温度为-30～-20℃，真空度为0.100～0.024mBar，冻干时间为3～5d。

优选的，步骤S3中，所述等离子处理器处理的条件为：气体采用氮气或氧气，处理功率为250～300W，压强50～60Pa，处理时间为10～15min。

优选的，步骤S4中，所述混合溶液中重组人表皮生长因子的浓度为40～80mg/L，二硫苏糖醇的浓度为4～8g/L，N,N-二(癸基丙胺基)-巯基甘氨酸的浓度为5～10g/L。