[发明专利]一种龙脷叶药材UPLC特征图谱构建方法及其鉴别方法有效
申请号: | 201910895240.5 | 申请日: | 2019-09-20 |
公开(公告)号: | CN110441444B | 公开(公告)日: | 2022-03-29 |
发明(设计)人: | 李国卫;魏梅;索彩仙;吴文平;曹斯琼;孙冬梅;陈向东;程学仁 | 申请(专利权)人: | 广东一方制药有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
代理公司: | 广州一锐专利代理有限公司 44369 | 代理人: | 杨昕昕;董云 |
地址: | 528000 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 龙脷叶 药材 uplc 特征 图谱 构建 方法 及其 鉴别方法 | ||
1.一种龙脷叶药材UPLC特征图谱构建方法,其特征在于,包含如下步骤:
(1)精密称取龙脷叶药材,制备得到龙脷叶供试品溶液;
(2)将龙脷叶供试品溶液采用超高效液相色谱仪分析,得到龙脷叶UPLC特征图谱;
所述超高效液相色谱仪分析的色谱条件为:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,柱温为28~32℃,以甲醇为流动相A,以体积分数0.34~0.45%的磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱,流速为0.25~0.36ml/min,检测波长为320~400nm,进样量为0.5~3μl;
梯度洗脱条件为:0~10min,流动相A的体积分数为6%,流动相B的体积分数为94%;10~15min,流动相A的体积分数变化为6~7%,流动相B的体积分数变化为94~93%;15~20min,流动相A的体积分数为7%,流动相B的体积分数为93%;20~25min,流动相A的体积分数变化为7~18%,流动相B的体积分数变化为93~82%;25~30min,流动相A的体积分数变化为18~23%,流动相B的体积分数变化为82~77%;30~40min,流动相A的体积分数变化为23~45%,流动相B的体积分数变化为77~55%;40~50min,流动相A的体积分数变化为45~59%,流动相B的体积分数变化为55~41%。
2.根据权利要求1所述的龙脷叶药材UPLC特征图谱构建方法,其特征在于,所述超高效液相色谱仪分析的色谱条件为:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,柱温为30℃,以甲醇为流动相A,以体积分数0.4%的磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱,流速为0.3ml/min,检测波长为349nm,进样量为1μl。
3.根据权利要求1所述的龙脷叶药材UPLC特征图谱构建方法,其特征在于,所述的供试品溶液通过包含如下步骤的方法制备得到:取龙脷叶粉末0.4~0.6g,精密加入45~55%甲醇20~30ml,超声处理25~35分钟,放冷,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
4.一种龙脷叶药材的鉴别方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)精密称取待鉴别龙脷叶药材,制备得到待鉴别龙脷叶样品溶液;
(2)精密吸取待鉴别龙脷叶样品溶液,注入超高效液相色谱仪,测定,即得待鉴别龙脷叶UPLC特征图谱;
(3)将测得的UPLC特征图谱与权利要求1~3任一项方法构建出的龙脷叶UPLC特征图谱进行比对,若与龙脷叶UPLC特征图谱一致,则该龙脷叶药材质量合格;
所述超高效液相色谱仪分析的色谱条件为:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,柱温为28~32℃,以甲醇为流动相A,以体积分数0.34~0.45%的磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱,流速为0.25~0.36ml/min,检测波长为320~400nm,进样量为0.5~3μl;
其中,梯度洗脱条件为:0~10min,流动相A的体积分数为6%,流动相B的体积分数为94%;10~15min,流动相A的体积分数变化为6~7%,流动相B的体积分数变化为94~93%;15~20min,流动相A的体积分数为7%,流动相B的体积分数为93%;20~25min,流动相A的体积分数变化为7~18%,流动相B的体积分数变化为93~82%;25~30min,流动相A的体积分数变化为18~23%,流动相B的体积分数变化为82~77%;30~40min,流动相A的体积分数变化为23~45%,流动相B的体积分数变化为77~55%;40~50min,流动相A的体积分数变化为45~59%,流动相B的体积分数变化为55~41%。
5.根据权利要求4所述的龙脷叶药材的鉴别方法,其特征在于,所述超高效液相色谱仪分析的色谱条件为:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,柱温为30℃,以甲醇为流动相A,以体积分数0.4%的磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱,流速为0.3ml/min,检测波长为349nm,进样量为1μl。
6.根据权利要求4所述的龙脷叶药材的鉴别方法,其特征在于,所述的待鉴别龙脷叶样品溶液通过包含如下步骤的方法制备得到:取龙脷叶粉末0.4~0.6g,精密加入45~55%甲醇20~30ml,超声处理25~35分钟,放冷,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
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