[发明专利]一种用于非阻塞性无精症的诊断盒

说明书

本申请中，检测了正常对照OA和NOA穿刺睾丸组织中SOX30基因甲基化状态和mRNA及编码蛋白表达水平，检测结果表明，SOX30基因在NOA穿刺睾丸组织中发生特异性高甲基化和表达沉默。基于以上检测结果，本申请提供一种用于非阻塞性无精症的诊断盒，能够帮助临床NOA患者制定有效治疗方案从而提高精准和治疗进度，同时对更好了解NOA致病原因、制定风险评估及早期诊断有重要意义。

技术领域

本申请涉及分子生物学技术领域，尤其涉及一种用于非阻塞性无精症的诊断盒。

背景技术

不育不孕作为影响人类繁衍的重要疾病已成为世界性的严重医学健康问题和沉重社会问题，受到人们的广泛关注。世界卫生组织(World Health Organization,WHO)预测，在影响人类生活和健康的疾病中不孕不育将成为继肿瘤和心血管疾病之后的第三大疾病。根据WHO最新统计数据显示，全球患有不育症的夫妇数量约为8000万对，其中，男性患者约占50％，且男性原因导致的不育所占比例呈现逐年上升态势。在我国，随着国家“二孩”政策的开放，男性不育问题显得尤为突出。男性不育症的病因非常复杂，病理机制尚不明确。尽管部分男性不育是由己知原因，如阻塞性无精症(obstructive azoospermia，OA)、隐睾和精索静脉曲张等造成，但多数男性不育被诊断为未知原因的非阻塞性无精症(Non-obstructive azoospermia，NOA)。

目前，针对NOA患者的诊断程序比较复杂，需要进行精液常规、精液生化、血液激素、睾丸形态和睾丸穿刺病理等分析，这些检测过程费时、费力，且严重影响患者病情和治疗进度。因此，亟待一种可快速、准确诊断NOA疾病的诊断盒。

发明内容

本申请提供了一种用于非阻塞性无精症的诊断盒，以解决现有的NOA检测过程费时、费力，且严重影响患者病情和治疗进度佳的问题。

本申请提供了一种用于非阻塞性无精症的诊断盒，包括试剂A，所述试剂A用于检测SOX30基因甲基化状态，

所述试剂A包括试剂A1与试剂A2，其中，所述试剂A1用于扩增甲基化产物，所述试剂A1包括一对甲基化引物，所述甲基化引物的引物序列分别为：

SOX30F-M:TGG GTA GTA GTT ATG GAG TTT TTT TC，

SOX30R-M:CTC TAA CTT CAC CTA CAA CAA CCG；

所述试剂A2用于扩增非甲基化产物，所述试剂A2包括一对非甲基化引物，所述非甲基化引物的引物序列分别为：

SOX30F-U:TGG GTA GTA GTT ATG GAG TTT TTT TT，

SOX30R-U:CTC TAA CTT CAC CTA CAA CAA CCA C。

可选地，所述诊断盒还包括试剂B，所述试剂B为用于检测基因SOX30表达水平的引物对，该引物对用于扩增SOX30特异性片段的RT-PCR，该引物对的引物序列分别为：

SOX30F:GAT GTC CCG CTC ACC GTG TTG C,

SOX30R:GAC AGG GCT TGG GCT CTG GAC T。

可选地，所述诊断盒还包括试剂C，所述试剂C为用于检测SOX30蛋白含量的试剂。

可选地，所述试剂C为SOX30蛋白的单克隆抗体。