[发明专利]一种高效降解3-甲基苯酚的菌株及其筛选方法和应用

说明书

本发明公开一种高效降解3‑甲基苯酚的菌株及其筛选方法和应用，涉及环境污染和微生物技术领域。此菌株是从工业废水中筛选纯化获得的，于2019年4月3日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号为CCTCC M 2019231。本发明通过对活性污泥进行一系列筛选培养，得到较大的单菌落，再经过分离、纯化后，获得高效降解3‑甲基苯酚的菌株。该菌株可以对工业生产过程中产生的含3‑甲基苯酚污水进行降解，且效果较理想。

技术领域

本发明涉及环境污染和微生物技术领域，特别涉及一种高效降解3-甲基苯酚的菌株及其筛选方法和应用。

背景技术

3-甲基苯酚(m-cresol)是高毒性和潜在致癌性的芳烃污染物烷基酚的重要代表之一，但它也是工业生产的重要原材料，主要用作农药中间体，生产杀虫剂杀螟松、倍硫磷、速灭威、二氯苯醚菊酯，也是彩色胶片、树脂、增塑剂和香料的中间体，同时也是甲苯等多种芳烃污染物代谢的中间产物，因此，3-甲基苯酚是在环境中广泛存在的污染物。如何经济、高效地去除环境中含3-甲基苯酚的污水中的3-甲基苯酚已成为水污染控制领域的研究热点。

发明内容

本发明的主要目的是提出一种高效降解3-甲基苯酚的菌株及其筛选方法和应用，旨在高效降解污水中有毒性和致癌性的3-甲基苯酚。

为实现上述目的，本发明提出一种高效降解3-甲基苯酚的菌株，所述高效降解3-甲基苯酚的菌株为睾丸酮丛毛单胞菌(Comamonas testosteroni)GEN05，保藏编号为CCTCCM 2019231，保藏时间为2019年4月3日。

本发明还提出一种如上所述的高效降解3-甲基苯酚的菌株的筛选方法，包括如下步骤：

将活性污泥接入液体无机盐培养基中，补加3-甲基苯酚，摇床培养7～10天后，取培养物接入新的液体无机盐培养基中，加入3-甲基苯酚进行传代培养；

将经过5～6次传代培养的培养物稀释成稀释菌液，取稀释菌液涂布至无机盐固体培养基平板，加入3-甲基苯酚后于培养箱中28℃～30℃培养7～10天；

挑取无机盐固体培养基上较大的单菌落，经过分离、纯化后，获得筛选菌株；

将筛选菌株接入新的液体无机盐培养基中，并加入3-甲基苯酚后摇床培养40～48小时，用HPLC测定培养基中的3-甲基苯酚的含量，筛选出培养基中3-甲基苯酚含量降低最多的菌株，即为3-甲基苯酚的高效降解菌株。

可选地，所述液体无机盐培养基包括以下浓度的组分：Na₂HPO₄·12H₂O 10.2～14.3g/L，KH₂PO₄ 2～3g/L，FeSO₄·7H₂O 0.2～0.3mg/L，MnSO₄·H₂O 0.05～0.07mg/L，MgSO₄·7H₂O 0.015～0.02mg/L，CaCl₂ 0.25～0.3mg/L，CuSO₄ 0.0125～0.2mg/L，ZnSO₄0.0125～0.2mg/L和H₃BO₃ 0.0125～0.2mg/L，(NH₄)₂SO₄ 2～3mM，所述液体无机盐培养基的pH值为7.0～7.5。

可选地，所述活性污泥质量与所述液体无机盐培养基的体积比为1g：20～100mL。

可选地，所述摇床培养的条件设置为28℃～30℃、180～200r/min。

可选地，所述3-甲基苯酚加入的浓度为2～3mM。