[发明专利]一种工业化利用杏鲍菇菌糠固体发酵生产漆酶和联产动物饲料的方法

说明书

本发明公开了一种工业化利用杏鲍菇菌糠固体发酵生产漆酶和联产动物饲料的方法。本发明利用一种杏鲍菇菌糠为菌种和基料，辅以甘蔗渣、油茶饼粕和生姜渣为碳源，硝酸铵为氮源，混合无机盐为诱导物，在一定条件下经固体发酵生产漆酶和联产动物饲料的方法。本发明是利用杏鲍菇菌渣作为主要原料来工业化联产漆酶和动物饲料的方法，具有收率高、工艺条件温和、制备周期短，未使用蛋白胨等高价原料，成本低廉，操作简单，能够工业生产。本发明同时提供了一条能够高值化利用废弃生物质的有效途径。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种工业化利用杏鲍菇菌糠固体发酵生产漆酶和联产动物饲料的方法。

背景技术

食用菌菌糠，简称菌糠，又称菇渣、菌渣、下脚料等，是指食用菌出菇后的培养基废弃物，含有大量的食用菌菌丝残体、胞外酶、多糖、被生物酶降解的粗纤维和未被完全利用的木质素等成分，是优质的生物质资源。据中国食用菌协会统计，2017年我国食用菌总产量3712万吨，按食用菌平均生物转化率40％计算，菌渣总产量约5568万吨。由于食用菌栽培户缺乏相应处理技术、监管不力等，导致大量的菌渣并没有被合理地应用，而是被随意丢弃，造成生物质资源浪费、栽培环境和水体污染，同时也对人体健康产生危害。

食用菌在菌丝体生长和出菇过程中，会分泌降解木质纤维素的胞外酶，包括漆酶、木质素过氧化酶、纤维素酶和木聚糖酶等，其中以漆酶研究的最为广泛。漆酶是一类含铜离子的多酚类氧化酶。最早由日本科学家于紫胶漆树中发现，1894年被正式命名为漆酶。漆酶的作用底物广泛，可以利用酚类、胺类等多种化合物作为底物，最终将分子氧还原成水，不产生其他副产物，因而也被称为“绿色催化剂”，它在有毒物的降解方面、生物传感器的构建、造纸业等领域具有非常好的应用。并且漆酶具有很好的热稳定性，使得漆酶能在各种特殊领域得到重用，例如在功能高分子的合成和污水处理等领域。

真菌在生长过程中能合成漆酶，并在菌丝生长过程中分泌到胞外。如糙皮侧耳、刺芹侧耳、环柄侧耳等，但漆酶酶活普遍不高。发明专利申请CN201310712411.9“一种制备漆酶的方法”，其生产菌株为虎皮香菇，漆酶发酵酶活为462.59U/mL；发明专利申请CN200910083514.7“一种漆酶及其制备方法与专用生产菌株”，其生产菌株为血红密孔菌，漆酶发酵酶活为300U/mL；发明专利申请CN101942421B“一种竹黄菌发酵生产漆酶的方法”，漆酶发酵酶活为500U/mL；发明专利申请CN200810198678.X“一种产漆酶的灵芝菌株”，漆酶发酵酶活为8620U/mL，是目前酶活较高的菌株。以上均是利用真菌发酵得到漆酶，需要加入大量的新鲜培养基料，生产成本高。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的上述问题，提供一种工业化利用杏鲍菇菌糠固体发酵生产漆酶和联产动物饲料的方法。

本发明的技术方案概述如下：

一种工业化利用杏鲍菇菌糠固体发酵生产漆酶和联产动物饲料的方法，包括如下步骤：

将新鲜的杏鲍菇菌糠破碎，按照1Kg：1～2L的质量体积比加入新鲜培养基，在25～30℃条件下避光发酵3～7天，然后按1Kg：10L的质量体积比加入水，搅拌6h，过滤，过滤液即为漆酶粗酶液；滤渣按1Kg：1×10⁶CFU的比列接种乳酸菌，混合均匀后装入厌氧发酵池，压实发酵7～14天，即得适合反刍动物食用的饲料。

所述新鲜培养基配方为：碳源7～16wt％，氮源8～15g/L，KH₂PO₄ 0.2～0.6g/L，ZnSO₄·7H₂O0.05g/L，MgSO₄·7H₂O 0.03g/L，CuSO₄·5H₂O 0.2～0.6g/L，CaCl₂·2H₂O0.008g/L，MnSO₄·H₂O0.03～0.08g/L。