[发明专利]一种哺乳动物细胞培养液的添加剂及细胞培养液有效
申请号: | 201910901420.X | 申请日: | 2019-09-23 |
公开(公告)号: | CN110607272B | 公开(公告)日: | 2022-11-01 |
发明(设计)人: | 房圆瑗;齐智;刘海英;巩俊廷 | 申请(专利权)人: | 山东甲骨文生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071 |
代理公司: | 北京专赢专利代理有限公司 11797 | 代理人: | 李斌 |
地址: | 255300 山东省淄博市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 哺乳动物 细胞 培养液 添加剂 | ||
本发明公开了一种哺乳动物细胞培养液的添加剂及细胞培养液,属于生物细胞技术领域。其中,本发明提供的一种哺乳动物细胞培养液的添加剂,其包括以下组分:乳白蛋白水解物、牛血清白蛋白、聚乙二醇、酵母粉。另外,本发明实施例提供的细胞培养液成分简单、成本低廉、使用方便,其不添加胰岛素及转铁蛋白,且通过调整乳白蛋白水解物、牛血清白蛋白等营养成分的用量可以解除细胞对血清、胰岛素及转铁蛋白的强烈依赖,从而可以降低细胞培养时的血清等成分含量。另外,本发明实施例通过添加聚乙二醇可以为细胞提供弱极性的温和环境,从而可以减少培养液中的极性物质对细胞的损害。
技术领域
本发明涉及生物细胞技术领域,具体是一种哺乳动物细胞培养液的添加剂及细胞培养液。
背景技术
由于传统哺乳动物细胞培养液除了需要使用DMEM(Dulbecco's Modified EagleMed ium)培养基或MEM(Minimum Eagle's Medium)培养基等作为基础培养基外,还需要往基础培养基中添加10%左右的胎牛血清或小牛血清,故其存在血清用量大、成本高等问题。而血清因为来源、加工工艺等因素影响,其生物安全性难有保证,且质量不稳定,最终会影响细胞生长及终产品质量。
另外,目前市售的低血清培养基成分复杂,胰岛素及转铁蛋白基本为必须添加成分。其中大部分产品在使用时需要经过长时间的低血清培养环境驯化,而绝大多细胞难以适应低血清环境而出现细胞生长缓慢甚至细胞死亡的情况。
发明内容
本发明的目的在于提供一种哺乳动物细胞培养液的添加剂及细胞培养液,以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的,本发明实施例提供如下技术方案:
一种哺乳动物细胞培养液的添加剂,包括以下按照重量份计的组分:乳白蛋白水解物5-12份、牛血清白蛋白2-3份、聚乙二醇10-30份、酵母粉2-10份。
本发明实施例采用的一种优选方案,所述的添加剂包括以下按照重量份计的组分:乳白蛋白水解物5-7份、牛血清白蛋白2-2.5份、聚乙二醇10-20份、酵母粉5-7份。
本发明实施例采用的另一种优选方案,所述的添加剂包括以下按照重量份计的组分:乳白蛋白水解物6份、牛血清白蛋白2份、聚乙二醇10份、酵母粉6份。
本发明实施例采用的另一种优选方案,所述聚乙二醇的平均分子量为5500-6500。
本发明实施例还提供了一种细胞培养液,其包括基础培养基、血清和上述添加剂。
本发明实施例采用的另一种优选方案,所述的血清为胎牛血清或小牛血清。
本发明实施例采用的另一种优选方案,所述血清的体积为基础培养基体积的2%-5%。
本发明实施例采用的另一种优选方案,所述添加剂与基础培养基的质量体积比以mg/L计为(1900-5500):1。
本发明实施例采用的另一种优选方案,所述的基础培养基为DMEM培养基或MEM培养基。
与现有技术相比,本发明实施例的有益效果是:
(1)本发明实施例通过往基础培养基添加含有乳白蛋白水解物、牛血清白蛋白、聚乙二醇和酵母粉的添加剂,可以降低在培养哺乳动物细胞时的血清用量,且可以使细胞在短时间内适应低血清生长环境,同时保持细胞良好的生长状态,从而可以降低培养细胞的成本。
(2)本发明实施例不添加胰岛素及转铁蛋白,其通过调整乳白蛋白水解物、牛血清白蛋白等营养成分的用量可以解除细胞对血清、胰岛素及转铁蛋白的强烈依赖,从而可以降低细胞培养时的血清等成分含量。
(3)本发明实施例通过添加聚乙二醇6000可以为细胞提供弱极性的温和环境,从而可以减少培养液中的极性物质对细胞的损害。
具体实施方式
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