[发明专利]一种石墨烯-纳米银复合物与双链DNA相互作用的检测方法有效
申请号: | 201910902216.X | 申请日: | 2019-09-14 |
公开(公告)号: | CN110702649B | 公开(公告)日: | 2022-09-16 |
发明(设计)人: | 徐香玉;杜中玉;杨林青;毛旭艳;刘君 | 申请(专利权)人: | 济宁医学院 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 272067 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 石墨 纳米 复合物 dna 相互作用 检测 方法 | ||
1.一种石墨烯-纳米银复合物与双链DNA相互作用的检测方法,具体包括如下步骤:
S1、备料:利用化学还原法合成石墨烯-纳米银复合物;
S2、对石墨烯-纳米银复合物与双链DNA相互作用进行紫外光谱测定:利用UV-Vis紫外分光光度计测量,以1200nm/min的速度测定波长范围在200nm到900nm处的吸光度;比色皿中双链DNA溶液的浓度固定为85.5uM,将干燥得到的固体rGO-Ag用乙醇和去离子水分别清洗三遍,再溶解成液体,其浓度为0mM,0.2mM,0.6mM,1.0mM,1.4mM,1.8mM,2.2mM;由紫外光谱检测分析可知,将rGO-Ag与双链DNA混合之后,双链DNA的特征吸收峰发生了变化,并且出现了新的吸收峰,表明两者发生了相互作用,且形成了rGO-Ag-DNA复合物;
S3、对石墨烯-纳米银复合物与双链DNA的相互作用进行荧光光谱测定:利用荧光分光光度计对荧光吸收光谱进行测量;激发波长设370nm,并且相应的扫描波段是450nm-700nm,激发狭缝和发射狭缝宽度分别为5nm和10nm;双链DNA的浓度为85.5uM,BR的浓度为66uM,rGO-Ag浓度为0mM,0.6mM,0.8mM,1.0mM,1.4mM,1.8mM,2.2mM;荧光光谱实验结果表明rGO-Ag能使双链DNA的荧光强度发生了猝灭,进一步说明两者形成了复合物;
S4、对石墨烯-纳米银复合物与双链DNA进行变温荧光测定:测定双链DNA体系的参数设置如下:激发波长370nm,扫描范围450-650nm,激发狭缝5nm,发射狭缝10nm,比色皿内双链DNA的浓度都固定为85.5uM;由变温荧光实验可知rGO-Ag与双链DNA的结合过程为静态猝灭过程,主要作用力为静电作用力;
S5、对检测结果进行分析。
2.根据权利要求1所述的一种石墨烯-纳米银复合物与双链DNA相互作用的检测方法,其特征在于:在S1中,利用化学还原法合成石墨烯-纳米银复合物,具体操作为:取透析后浓度为1mg/ml的氧化石墨烯25ml,配置银氨溶液,将52.5mgAgNO3溶解于2.5ml去离子水中,并将3%氨水滴入硝酸银水溶液中直到沉淀刚好消失,将刚配置好的银氨溶液和氧化石墨烯水溶液搅拌混合30min,然后加入含有25ml含有0.5g葡萄糖的水溶液,将混合溶液加热搅拌反应1h,待反应溶液自然冷却后,用乙醇和去离子水分别对产物进行3次离心洗涤,将所得固体进行真空干燥。
3.根据权利要求2所述的一种石墨烯-纳米银复合物与双链DNA相互作用的检测方法,其特征在于:在50℃下将刚配置好的银氨溶液和氧化石墨烯水溶液搅拌混合30min。
4.根据权利要求2所述的一种石墨烯-纳米银复合物与双链DNA相互作用的检测方法,其特征在于:将混合溶液加热到95℃,混合溶液在95℃下搅拌反应1h。
5.根据权利要求2所述的一种石墨烯-纳米银复合物与双链DNA相互作用的检测方法,其特征在于:将所得固体在60℃真空干燥24h。
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