[发明专利]一种猪口服接种疫苗缓释佐剂及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种猪口服接种疫苗缓释佐剂，其特征在于，按质量百分数计，由60～80％聚合物和20～40％抗原组成；

或者由45～80％聚合物、18～27％抗原和2～28％免疫助剂组成；

所述各组成的质量百分数之和为100％；

所述聚合物为聚2-乙烯基吡啶或聚4-乙烯基吡啶；

所述抗原为猪回肠炎活疫苗、猪繁殖与呼吸综合症灭活疫苗、猪支原体肺炎灭活疫苗、猪伪狂犬灭活疫苗、猪口蹄疫灭活疫苗、猪圆环病毒2型杆状病毒载体灭活疫苗、猪链球菌双价灭活疫苗和副猪嗜血杆菌病灭活疫苗中的至少一种；

所述免疫助剂为革兰氏阴性菌内毒素、磷酸铝、聚肌苷酸和花生油中的至少一种。

2.根据权利要求1所述一种猪口服接种疫苗缓释佐剂，其特征在于，所述聚2-乙烯基吡啶的分子量为20～63kDa，或者为50～57kDa；所述聚4-乙烯基吡啶的分子量为27～65kDa，或者为60～62kDa。

3.根据权利要求1所述一种猪口服接种疫苗缓释佐剂，其特征在于，所述猪口服接种疫苗缓释佐剂，按质量百分数计，由76～80％聚合物和20～23％抗原组成；

所述革兰氏阴性菌内毒素为大肠杆菌内毒素、变形杆菌内毒素、痢疾杆菌内毒素、肺炎杆菌内毒素、布氏杆菌内毒素、流感嗜血杆菌内毒素、副流感嗜血杆菌内毒素、百日咳杆菌内毒素和副百日咳杆菌内毒素中的至少一种；

所述免疫助剂为聚肌苷酸和花生油乳化佐剂中的至少一种。

4.权利要求1～3任一项所述一种猪口服接种疫苗缓释佐剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将聚合物乙醇溶液、抗原水溶液混合均匀后，或者将聚合物乙醇溶液、抗原水溶液和免疫助剂混合均匀后，在4～40℃下孵育0.5～4小时，去除溶剂，得到猪口服接种疫苗缓释佐剂。

5.根据权利要求4所述一种猪口服接种疫苗缓释佐剂的制备方法，其特征在于，所述聚合物乙醇溶液的浓度为0.01～0.05g/mL，抗原水溶液的浓度为1～2mg/mL。

6.根据权利要求5所述一种猪口服接种疫苗缓释佐剂的制备方法，其特征在于，所述聚合物乙醇溶液、抗原水溶液和免疫助剂混合均匀的方式为：在搅拌状态下以恒定流速向聚合物乙醇溶液中加入抗原水溶液和免疫助剂，或是以恒定流速向抗原水溶液中加入聚合物乙醇溶液和免疫助剂，所述恒定流速为0.5～5mL/min。

7.根据权利要求5所述一种猪口服接种疫苗缓释佐剂的制备方法，其特征在于，所述混合均匀和孵育可通过微流控技术同时进行，通过微流控技术控制流速，在混合过程中孵育，在微流控芯片上利用微液滴形成技术，连续生产尺寸均一、单分散性好的纳米胶束；所述流速为5～50μL/h。

8.根据权利要求7所述一种猪口服接种疫苗缓释佐剂的制备方法，其特征在于，所述聚合物乙醇溶液、抗原水溶液混合均匀和孵育同时进行的方式为：采用具有双进样口蛇形通道的微流控芯片作为聚合物、抗原自组装形成纳米胶束的场所，微流控系统控制聚合物乙醇溶液、抗原水溶液的流速，连续生产尺寸均一、单分散的纳米胶束；

所述聚合物乙醇溶液、抗原水溶液和免疫助剂混合均匀和孵育同时进行的方式为：采用具有三进样口蛇形通道的微流控芯片作为聚合物、抗原和免疫助剂自组装形成纳米胶束的场所，微流控系统控制聚合物乙醇溶液、抗原水溶液和免疫助剂的流速，连续生产尺寸均一、单分散的纳米胶束。

9.根据权利要求5所述一种猪口服接种疫苗缓释佐剂的制备方法，其特征在于，所述免疫助剂为革兰氏阴性菌内毒素、磷酸铝和聚肌苷酸中的至少一种时，以水溶液形式加入，所述水溶液的浓度为0.05～2g/mL；

所述去除溶剂指去除乙醇和水；所述去除溶剂的方法为：将产物混合液经0.45μm滤膜过滤，收集滤液，通过高效液相层析纯化并收集纳米胶束，-40～5℃冷冻干燥6～24小时，即得猪口服接种疫苗缓释佐剂。

10.权利要求1～3任一项所述一种猪口服接种疫苗缓释佐剂在生物医药领域中的应用。