[发明专利]一种植物糖原猪口服接种疫苗纳米佐剂及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种植物糖原猪口服接种疫苗纳米佐剂及其制备方法与应用。方法为：(1)将抗原加入到植物糖原水溶液中，振荡吸附，得到混合液；(2)冰浴条件下，将脂肪酸加入到混合液中，超声，得到乳液，透析，得到植物糖原猪口服接种疫苗纳米佐剂；植物糖原猪口服接种疫苗纳米佐剂中，植物糖原的含量为0.5～10wt％，抗原的含量为0.01～2wt％，脂肪酸的含量为0～20wt％。制得的植物糖原基纳米佐剂不仅耐受降解能够延缓抗原的释放，与脂肪酸混合所形成的水包油型乳剂的抗氧化性更强，可提高整体的稳定性，能够更好的保护抗原，来源安全可靠，以植物糖原作为疫苗佐剂，成本低、安全高效，对动物具有良好的预防保护能力。

技术领域

本发明属于兽用生物制品领域，具体涉及一种植物糖原猪口服接种疫苗纳米佐剂及其制备方法与应用。

背景技术

口服免疫，在现代化养殖产业中是一种最简单易行、最易于实施的免疫途径。然而，口服免疫途径面临挑战，限制了其广泛应用。由于需要经过消化道，疫苗成分常常发生降解，因而免疫原性较弱，难以引起有效免疫应答甚至有时无免疫应答，需要添加一定剂量的安全有效的佐剂。疫苗免疫佐剂已经成为组成新型疫苗不可缺少的一部分。佐剂现已被用于提高部分灭活疫苗的免疫原性、增强低应答人群的免疫应答、改善疫苗经黏膜途径接种的免疫原性及调节不恰当的免疫应答等从而提高保护性免疫力。已被证实由佐剂活性的物质包括铝佐剂、脂质体乳剂、蛋白多糖、细菌样颗粒等。

虽然很多物质被证明是有佐剂效应的，但选择或开发一种优良的佐剂需要综合考虑多方面的因素。首先需要的就是佐剂的安全性。由于佐剂有其自身的药理学特性，可能会影响疫苗抗原的免疫原性和安全性。应用最广泛的铝佐剂，虽然免疫效果较好，但也存在局限性和不足。冷冻后的铝佐剂结构会发生改变，出现聚集现象。因为铝佐剂的冷冻敏感性，而无法冷冻贮存，需要再添加一定的冷冻保护剂，增加安全风险。另有报道发现铝佐剂也可诱导产生IgE，有可能引起超敏反应，严重时注射部分发生溃烂，局部发生炎症反应。除了传统的铝佐剂，水包油乳剂的应用也越来越广泛。常用来制备水包油乳剂的是一种角鲨烯油，能在高压条件下形成均一性较好的滴状乳液，稳定性较高。然而水包油乳剂的副作用比铝佐剂还严重，更容易引起注射部位的炎症反应，长期使用还会引起肝损伤。其它佐剂，如核酸类佐剂在动物模型中发现能诱发自身免疫性疾病，出现了安全问题。因此，佐剂对动物的免疫系统产生的刺激作用必须在合适的、可预期的范围内。开发生物安全的新型佐剂已成为疫苗发展的研究趋势。世界卫生组织在2012年启动了全球疫苗安全行动，目的是为了加强疫苗药物警戒能力，实施全球疫苗安全。目前已有报道使用环糊精衍生物作为疫苗佐剂，然而环糊精衍生化修饰后分离提纯步骤复杂，工作量大，难以大规模生产。

发明内容

为解决现有技术的缺点和不足之处，本发明的首要目的在于提供一种植物糖原猪口服接种疫苗纳米佐剂的制备方法。

本发明的另一目的在于提供上述方法制得的一种植物糖原猪口服接种疫苗纳米佐剂。所述植物糖原猪口服接种疫苗纳米佐剂由高度分支的可溶性多糖即植物糖原制得。

本发明的再一目的在于提供上述一种植物糖原猪口服接种疫苗纳米佐剂在制备生物医药材料领域中的应用。

本发明目的通过以下技术方案实现：

一种植物糖原猪口服接种疫苗纳米佐剂的制备方法，包括以下步骤：

（1）将抗原加入到植物糖原水溶液中，4~30℃振荡吸附0.5~12h，得到混合液；

（2）冰浴条件下，将脂肪酸加入到步骤（1）的混合液中，超声1~4h，得到乳液，透析，得到植物糖原猪口服接种疫苗纳米佐剂；

其中，植物糖原猪口服接种疫苗纳米佐剂中，植物糖原的含量为0.5~10wt%，抗原的含量为0.01~2wt%，脂肪酸的含量为0.5~5wt%。