[发明专利]一种微量维生素B9的电化学检测方法

说明书

本发明涉及一种微量维生素B9的电化学检测方法，属于维生素分析检测技术领域，该检测方法中将特定样品处理液与杯芳烃丙酮饱和溶液修饰的维生素检测仪传感器探头配合使用，再进一步优化电化学检测条件，最终能够更加灵敏、快捷、准确的检测微量维生素B9，且应用范围广，可用于血样、药物、食品等样品中微量维生素B9的快速检测。该方法简单易操作，且检测时间较短，无需专门技术人员进行操作，易推广。

技术领域

本发明属于维生素分析检测技术领域，具体涉及一种微量维生素B9的电化学检测方法，特别涉及检测血样、药物、食品等样品中的微量维生素B9。

背景技术

维生素B9是机体为维持正常生理功能必须由食物摄取的一类微量有机物，在胎儿生长发育过程发挥重要作用，缺乏B9可能导致严重的中枢神经系统发育障碍，如无脑儿或脊柱膨出或脊柱裂等，并可能出现巨幼红细胞性贫血。

目前，检测人体维生素B9含量的仪器和检测方法各有不同，主要紫外分光光度法、荧光分析法、高效液相色谱法等。其中，高效液相色谱法中的前处理技术繁琐耗时、需要较多有机溶剂，且血清需要量较大。目前应用于维生素检测的仪器有：韩国Younglin公司研制出了维生素分析仪，利用高效液相方法检测食品、药品中的各种维生素；德国拜发R-Biopharm公司利用荧光法生产出检测维生素的仪器。由于高效液相色谱仪、荧光分析仪等仪器价格昂贵，并且需要专门技术人员进行操作，检测方法繁杂，检测时间较长，所以不易推广。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种微量维生素B9的电化学检测方法。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1、一种微量维生素B9的电化学检测方法，所述方法如下：

(1)将等体积浓度不同的维生素B9标准样品分别与BR缓冲液混匀，然后分别利用差分脉冲法检测各维生素B9标准样品在杯芳烃丙酮饱和溶液修饰的维生素检测仪传感器探头上发生氧化还原反应时产生的电流信号，获得不同浓度维生素B9标准样品的电流信号值，制定标准曲线；

(2)取待测样品与BR缓冲液混匀，然后利用差分脉冲法检测所述待测样品在杯芳烃丙酮饱和溶液修饰的维生素检测仪传感器探头上发生氧化还原反应时产生的电流信号，获得所述待测样品产生的电流信号值，最后根据所述待测样品产生的电流信号值及步骤(1)中制定的标准曲线，获取所述待测样品中维生素B9的含量。

优选的，步骤(1)和步骤(2)中，所述BR缓冲液的浓度为0.001～2.0mol/L，pH值为1.0～9.0。

优选的，步骤(1)和步骤(2)中，所述杯芳烃丙酮饱和溶液修饰的维生素检测仪传感器探头的制备方法如下：取10～50μL杯芳烃丙酮饱和溶液，滴于维生素检测仪传感器探头中经0.05-1μm氧化铝粉打磨处理的玻碳电极表面，待丙酮完全挥发干燥后即可。

优选的，步骤(1)和步骤(2)中，所述杯芳烃丙酮饱和溶液修饰的维生素检测仪传感器探头的制备方法如下：取30μL杯芳烃丙酮饱和溶液，滴于维生素检测仪传感器探头中经0.03μm氧化铝粉打磨处理的玻碳电极表面，待丙酮完全挥发干燥后即可。

优选的，步骤(1)和步骤(2)中，所述维生素检测仪的富集电沉积电位为-600～300mV，富集电沉积时间0～360s，初始电位为-500～100mV，终止电位为100～1000mV，扫描速度为10～500mV/s，取样间隔为4～20mV，静止时间10～60s，休止电位为200～600mV，休止时间为10～60s，量程为0.0001～50mA。

优选的，步骤(1)和步骤(2)中，所述维生素检测仪的富集电沉积电位为200mV，富集电沉积时间为240s，初始电位为100mV，终止电位为1000mV，扫描速度为40mV/s，取样间隔为10mV，静止时间为20s，休止电位为300mV，休止时间为30s，量程为0.0001～50mA。